產(chǎn)品名稱:布魯氏菌(牛、豬、羊)核酸快速檢測試劑盒
英文名稱:Rapid Detection kit for Brucella spp
產(chǎn)品編號與包裝規(guī)格:
編號 | 規(guī)格 |
KJD12L | 24 測試/盒 |
產(chǎn)品簡介:本試劑盒基于環(huán)介導(dǎo)的恒溫擴(kuò)增技術(shù)(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP),用于主要感染牛、豬、羊種布魯氏菌的快速檢測,可通過肉眼觀察反應(yīng)管中試劑顏色變化判讀結(jié)果。
檢測原理:利用兩對特殊引物和具有鏈置換活性的Bst DNA聚合酶,使模板兩端引物結(jié)合處循環(huán)出現(xiàn)環(huán)狀單鏈結(jié)構(gòu),引物順利與模板結(jié)合并進(jìn)行鏈置換擴(kuò)增反應(yīng),實現(xiàn)在恒溫條件下(60-65℃)進(jìn)行連續(xù)快速擴(kuò)增。反應(yīng)加入顯色指示劑,陰陽性結(jié)果顯色差異顯著,可直接通過顏色變化判讀結(jié)果。
產(chǎn)品特點(diǎn):
1. 快速簡便:將酶、引物等反應(yīng)組分混勻后進(jìn)行干粉化處理,增加試劑穩(wěn)定性,使用時減少溶液配制步驟,更為便捷,整個檢測反應(yīng)可在1 h內(nèi)完成;
2. 特異性高:利用靶基因序列上的多個獨(dú)立區(qū)域設(shè)計多條引物,保證擴(kuò)增反應(yīng)的高度特異性;
3. 靈敏度高:最低檢驗限達(dá)到10 CFU/Test;
4. 判讀簡單:反應(yīng)前加入顯色指示劑,反應(yīng)后通過肉眼觀察反應(yīng)液顏色變化或者經(jīng)熒光監(jiān)測儀器跟蹤熒光圖譜的變化判讀結(jié)果,直觀方便,且可有效避免反應(yīng)后開蓋造成的氣溶膠污染。
布魯氏菌核酸快速檢測試劑盒產(chǎn)品組分:
組分編號 | 組分名稱 | 規(guī)格數(shù)量 |
DRL12 | 檢測試劑(凍干) | 3排 × 8管 |
FRL04 | 復(fù)溶液 | 650μL × 1管 |
PRL12 | 陽性對照(凍干) | 1管 |
SHR01 | 陰性對照(凍干) | 1管 |
SHR02 | 裂解液 | 1mL × 1管 |
SHR03 | 顯色指示劑 | 80μL× 1管 |
SHR04 | 超純水 | 1mL× 1管 |
說明書 | 1份 |
儲存條件與保質(zhì)期:2~8℃條件下儲存,有效期為12個月。
適用儀器:
1. PCR儀器或金屬浴恒溫器,如果檢測樣品為DNA樣品,水浴鍋即可。
2. 高速離心機(jī),樣品的前處理需要用高速離心機(jī)做分離。
樣品處理:
1. 微生物樣品前處理:實驗室中的布魯氏菌在合適的固體培養(yǎng)基中劃線培養(yǎng),往200 μL PCR管中加入30 μL裂解液,挑取布魯氏菌菌至裂解液中充分懸浮,輕彈管壁消除氣泡,99℃加熱10 min進(jìn)行滅活和熱裂解處理。12000 r/min離心15 min,上清即為粗提的DNA,可轉(zhuǎn)移至200 μL PCR管中,在-20℃保存?zhèn)溆谩?/p>
2. 在步驟1中培養(yǎng)的布魯氏菌可用細(xì)菌DNA提取試劑盒按照說明書指導(dǎo)提取布魯氏菌DNA,-20℃保存?zhèn)溆谩?/span>
注:活性布魯氏菌,可感染人畜,具有高度傳染性,操作時需按照相應(yīng)生物安全等級操作規(guī)范進(jìn)行。
3. 臨床樣本處理:用商品化試劑盒按照操作說明書中從血清樣本中提取DNA,-20℃保存?zhèn)溆谩?/p>
布魯氏菌核酸快速檢測試劑盒使用指南:
1,陰、陽性對照和干粉試劑復(fù)溶
A. 陰、陽性對照復(fù)溶:首次使用時,加入80 μL超純水至陽性對照和陰性對照凍干粉中,待溶解后混勻,-20℃存儲待用 。
B. 干粉試劑復(fù)溶:取出凍干粉試劑,按照需求剪取n個檢測試劑管(n=待檢測樣品數(shù)+1管陽性對照+1管陰性對照),每管加入20 μL復(fù)溶液,完全溶解后待用。
2,擴(kuò)增反應(yīng)
A. 打開能夠提供恒溫條件的儀器,設(shè)置到64℃待用;
B. 向上述已加入復(fù)溶液的n個反應(yīng)管中各加入顯色指示劑2.5 μL;
C. 向上述已加入復(fù)溶液的n個反應(yīng)管中分別加入待測樣品DNA、陰性對照、陽性對照各2.5 μL,蓋緊蓋子;
D. 將所有的反應(yīng)管置于恒溫儀器中,反應(yīng)55 min。
3,結(jié)果判讀:反應(yīng)結(jié)束后,建議在自然光線充足的環(huán)境條件下,將樣品置于白色背景下觀察結(jié)果,陰性對照檢測試劑管呈淡橙色,陽性對照檢測試劑管呈熒光綠,待測樣品反應(yīng)管以此作為對照進(jìn)行判讀,若陰陽對照反應(yīng)管任一結(jié)果與上述情況不符,則本次檢測結(jié)果無效,應(yīng)重新檢測或與產(chǎn)品技術(shù)支持聯(lián)系。
LAMP檢測操作指南
LAMP使用方法
更多恒溫?zé)晒夥ê怂峥焖贆z測試劑盒 產(chǎn)品列表:
貨號 | 產(chǎn)品名稱 | 用途 |
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