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環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)在食品中痢疾志賀氏菌快速檢測

發(fā)布時(shí)間:2019-07-22    瀏覽次數(shù):6466

摘 要:【目的】探討、優(yōu)化基于環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)(LAMP)快速檢測常規(guī)食品中感染性痢疾 志賀氏菌的方法?!痉椒ā吭?NCBI 數(shù)據(jù)庫中搜索獲取志賀氏菌的特異性基因高度保守區(qū),設(shè) 計(jì) 3 對(duì) LAMP 反應(yīng)引物,建立、優(yōu)化該 LAMP 可視化檢測方法,并評(píng)價(jià)其特異性、靈敏度, 同時(shí)與 PCR 檢測方法和傳統(tǒng)檢測方法對(duì)比,進(jìn)行結(jié)果統(tǒng)計(jì)分析。【結(jié)果】5 株志賀氏菌標(biāo)準(zhǔn)菌 株樣品均檢測為陽性,11 株非志賀氏菌標(biāo)準(zhǔn)菌株樣品均檢測為陰性,無交叉反應(yīng)。最低檢驗(yàn) 限為 1.6×101 CFU/反應(yīng)(或 1.6×101 CFU/mL),且經(jīng)比較,LAMP 檢測靈敏度比 PCR 檢測高出 1 個(gè)數(shù)量級(jí)。通過對(duì) 161 份實(shí)際樣品和人工污染樣品進(jìn)行檢測,LAMP 檢測與傳統(tǒng)方法檢測結(jié) 果具有較高的一致性?!窘Y(jié)論】LAMP 具有檢測過程快速簡便、檢測結(jié)果穩(wěn)定、可靠的特點(diǎn), 適用于對(duì)常規(guī)食品中感染性痢疾志賀氏菌的高效、快速檢測需求。 

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