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NGS Second-Strand cDNA Synthesis Kit(NGS第二鏈cDNA合成試劑盒)

英文名稱:NGS Second-Strand cDNA Synthesis Kit

貨 號 :HKN422系列

規(guī) 格 :20次 | 100次

用途:用于二代測 序(NGS)文庫構建中 cDNA 第二鏈的合成

瀏覽次數(shù):4314次

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商品詳細
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產(chǎn)品名稱:NGS Second-Strand cDNA Synthesis Kit
中文名稱:NGS第二鏈cDNA合成試劑盒

產(chǎn)品編號與包裝規(guī)格:

編號產(chǎn)品名稱
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規(guī)格產(chǎn)品介紹價格
HKN422系列NGS Second-Strand cDNA Synthesis Kit20次 | 100次crispr基因編輯(合成雙鏈cDNA試劑盒)
HKN422ANGS Second-Strand cDNA Synthesis Kit20次2220
HKN422BNGS第二鏈cDNA合成試劑盒100次9958

產(chǎn)品描述:NGS Second-Strand cDNA Synthesis kit 是一種在合成了 cDNA 第一鏈的基礎上去除 RNA-DNA 雜合鏈中的 RNA 鏈,并合成 cDNA 第二鏈,最終形成雙鏈 cDNA 的試劑盒。主要用于二代測 序(NGS)文庫構建中 cDNA 第二鏈的合成。

產(chǎn)品特點:
      1) 本試劑盒包含了進行 cDNA 第二鏈合成所需的各種試劑, 簡便,高效;
      2) 合成的雙鏈 cDNA,可以直接用于后續(xù)的常規(guī) PCR、real-time PCR、 cDNA 文庫的構建等。

應用實例:

1、cDNA 第二鏈合成
      模板:采用體外轉錄 RNA 為模板逆轉錄得到 810bp cDNA

cDNA 第二鏈合成

      M:DL2000;
      泳道 1:逆轉錄得到 cDNA 第一鏈;
      泳道 2:protein cDNA 第二鏈合成試劑盒得到 cDNA 第二鏈;
      泳道 3:A 公司 cDNA 第二鏈合成試劑盒得到 cDNA 第二鏈;

2、cDNA 第二鏈合成產(chǎn)物酶切驗證
      DNase I 能消化 DNA-RNA 雜合鏈中的 DNA 和 dsDNA,而 RNase H 消化 DNA-RNA 雜合鏈中的 RNA,不消化 dsRNA。

cDNA 第二鏈合成產(chǎn)物酶切驗證

      M:DL2000;
      泳道 1:cDNA 第一鏈;
      泳道 2:cDNA 第一鏈+DNase I;
      泳道 3:cDNA 第一鏈+RNaseH;
      泳道 4:cDNA 第二鏈;
      泳道 5:cDNA 第二鏈+DNase I;
      泳道 6:cDNA 第二鏈+ RNaseH;

NGS Second-Strand cDNA Synthesis Kit 產(chǎn)品包裝:

產(chǎn)品組成A包裝B包裝
NGS Second-Strand
DNA Synthesis Enzyme Mix
100μl500μl
NGS Second-Strand
cDNA Synthesis Reaction Buffer
500μl1ml×3
RNase Free Water1ml×21ml×6

操作方法:

1,在冰上向已完成的 cDNA 第一鏈 20μl 反應體 系中依次加入如下試劑:

產(chǎn)品組成體積
First-Strand Synthesis product20ul
Second-Strand cDNA Synthesis Enzyme Mix5μl
Second-Strand cDNA Synthesis Reaction Buffer20μl
RNase free water55ul

2,按上述體系輕輕混勻,隨后離心沉淀液體。
3,16℃孵育 2 小時,熱蓋溫度不超過 40℃。
4,75℃ 熱 失 活 20min ; 或 加 入 5μl 0.5M EDTA(pH8.0)終止反應。
5,后續(xù)使用磁珠純化、酚氯仿抽提、乙醇沉淀 等方法純化合成的雙鏈 cDNA,也可以使用 適應的 DNA 純化試劑盒進行純化。

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