產(chǎn)品名稱:產(chǎn)氣莢膜梭菌核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)
英文名稱:Rapid Detection Kit for Clostridium perfringens(Fluorescent Probe Assays)
產(chǎn)品編號與包裝規(guī)格:
編號 | 規(guī)格 |
FZ003BF2 | 48 測試/盒 |
產(chǎn)品簡介:本試劑盒僅適用于食品和水體中產(chǎn)氣莢膜梭菌的定性檢測。
檢測原理:基于Real Time PCR技術,利用針對于產(chǎn)氣莢膜梭菌特異性基因的引物、熒光探針以及其他反應所需試劑,加入待檢樣品即可進行擴增反應。在發(fā)生擴增過程中,熒光探針與目的基因片段結(jié)合,可被Taq酶分解并產(chǎn)生熒光信號,此時熒光定量PCR儀可識別該熒光信號,同時根據(jù)其強弱變化繪制出相應的實時擴增曲線,進而判定產(chǎn)氣莢膜梭菌是否檢出。
產(chǎn)氣莢膜梭菌核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)產(chǎn)品組分:
儲存條件與保質(zhì)期:-20℃避光儲存,有效期為12個月,避免反復凍融。
靈敏度:最低檢驗限達到100 CFU/Test
所需其他材料和適用儀器:熒光定量PCR儀(具有能夠檢測FAM標記的熒光通道)、高速離心機、移液器、移液槍頭及離心管等。
產(chǎn)氣莢膜梭菌核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)使用指南:
1,樣品前處理
1) 樣品增菌液模板 DNA 的制備:
a) 樣品前處理:取250 mL待檢水樣進行抽濾,濾膜置于100 mL梭菌增菌培養(yǎng)基培養(yǎng),36 ℃±1 ℃增菌18~24 h;
b) 取以上增菌液1 mL到1.5 mL規(guī)格的無菌離心管中,6000 r/min離心5 min,完全去除上清;
c) 加入30 μL裂解液充分懸浮管底沉淀,輕彈管壁消除氣泡,99℃加熱10 min;
d) 12000 r/min離心15 min,上清即為待測樣品DNA,靜置冰上,長時間不用應再次離心。
2) 可疑菌落模板 DNA 的制備:挑取可疑菌落,充分懸浮于預先加有30 μL裂解液的無菌離心管中,后按照上述步驟c)、d)操作。
2, 加樣、反應
1) 按照需求取n個PCR反應管(n=1管陰性對照+待檢測樣品數(shù)+1管陽性對照),從試劑盒中取出預混液,充分融化,渦旋后短暫離心,以上每管加入20 μL預混液,待用。
2) 向上述n個反應管中分別加入陰性對照、待測樣品DNA、陽性對照各5 μL,總反應體積為25 μL。蓋緊管蓋,短暫離心,立即進行PCR擴增反應。
3) PCR反應體系為25 μL,取FAM檢測通道,在反應階段2中60℃時收集熒光信號,具體程序如下:
反應階段 | 溫度 | 時間 | 信號收集 | 循環(huán)數(shù) |
1 | 95°C | 30 sec | 1 | |
2 | 95°C | 5 sec | } 40 | |
60°C | 40 sec | ? |
3, 結(jié)果:一般情況下,可通過軟件自動設定的基線、閾值等直接讀取檢測結(jié)果。如需調(diào)整,可根據(jù)所使用儀器的自身情況(如噪聲等)以及選取的不同熒光通道進行調(diào)整。
1) 質(zhì)量控制:陰性對照未出現(xiàn)明顯的S型擴增曲線或Ct值>35,陽性對照出現(xiàn)S型擴增曲線且其Ct值<30。若陰陽性對照不同時滿足上述條件,則本次檢測結(jié)果無效,應重新檢測或與產(chǎn)品技術支持聯(lián)系。
2) 結(jié)果判讀:(根據(jù)反應所得Ct值判讀,具體見下表:)
Ct值 | 結(jié)果判讀 |
≤35 | 產(chǎn)氣莢膜梭菌陽性。 |
35~37 | 建議重新檢測,若結(jié)果Ct≥37,則產(chǎn)氣莢膜梭菌陰性,反之則為產(chǎn)氣莢膜梭菌陽性。 |
≥37 | 產(chǎn)氣莢膜梭菌陰性。 |
更多實時熒光PCR檢測試劑盒(食源性致病菌檢測系列) 產(chǎn)品列表:
貨號 | 產(chǎn)品名稱 | 用途 |
FZ004BF2 | 金黃色葡萄球菌核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) | 用于食品樣本或可疑菌落中金黃色葡萄球菌的檢測 |
FZ005BF2 | 沙門氏菌核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) | 用于食品中沙門氏菌的檢測 |
FZ006BF2 | 志賀氏菌核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) | 用于食品中志賀氏菌的定性檢測 |
FZ007BF2 | 單增李斯特氏菌核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) | 用于食品中單增李斯特氏菌的檢測 |
FZ008BF2 | 副溶血性弧菌核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) | 用于食品中副溶血性弧菌的定性檢測 |
FZ009BF2 | 大腸埃希氏菌O157:H7核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) | 用于食品中大腸埃希氏菌O157:H7 的檢測 |
FZ010BF2 | 阪崎腸桿菌核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) | 用于食品中阪崎克羅諾桿菌的檢測 |
FZ011BF2 | 小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) | 用于食品中小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌的檢測 |
FZ012BF2 | 布魯氏菌核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) | 用于食品中布魯氏菌的檢測 |
FZ013BF2 | 溶藻弧菌核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) | 用于食品、水產(chǎn)樣本中溶藻弧菌的檢測 |
FZ014BF2 | 創(chuàng)傷弧菌核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) | 用于食品中創(chuàng)傷弧菌的檢測 |
FZ015BF2 | 嗜肺軍團菌核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) | 用于飲用水、非飲用水、公共場所環(huán)境樣本中嗜肺軍團菌的檢測 |
FZ016BF2 | 唐菖蒲伯克霍爾德氏菌核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) | 于食品中唐菖蒲伯克霍爾德氏菌的定性檢測 |
FZ017BF2 | 大腸埃希氏菌志賀毒素核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) | 用于食品中致病性大腸埃希氏菌(STEC)產(chǎn)志賀毒素類型的定性檢測 |
FZ001BF2 | 銅綠假單胞菌核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) | 包裝飲用水等水體中銅綠假單胞菌的定性檢測 |
FZ002BF2 | 糞鏈球菌核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) | 包裝飲用水等水體中糞鏈球菌(EF)的定性檢測 |