DMEM高糖、DMEM低糖、DMEM/F-12培養(yǎng)基到底啥差別?
發(fā)布時間:2023-04-04 瀏覽次數(shù):1161
DMEM高糖培養(yǎng)基
DMEM高糖培養(yǎng)基是在MEM培養(yǎng)基基礎上改良而來,目前已廣泛應用于各種細胞的培養(yǎng)。DMEM高糖培養(yǎng)基普遍應用于生長快、粘附性低的細胞??捎糜诙喾N哺乳動物原代細胞的培養(yǎng),例如原代成纖維細胞、神經(jīng)細胞、神經(jīng)膠質細胞、HUVEC、平滑肌細胞等,也可以用于一些細胞系的培養(yǎng),例如Hela、293、Cos-7及PC-12等。
DMEM低糖培養(yǎng)基
DMEM低糖培養(yǎng)基是一種應用十分廣泛的培養(yǎng)基,可用于許多哺乳動物細胞培養(yǎng)。DMEM低糖培養(yǎng)基適合代謝作用慢、依賴性貼壁細胞的培養(yǎng)。
DMEM/F-12培養(yǎng)基
DMEM/F-12培養(yǎng)基是將DMEM與Ham's F-12培養(yǎng)基以1:1比例混合改良而來的。改良得到的DMEM/F-12培養(yǎng)基,營養(yǎng)成分更為豐富,含有更多種微量元素,廣泛應用于多種哺乳類細胞的培養(yǎng),也適用于低血清含量下哺乳動物細胞的培養(yǎng)以及克隆密度培養(yǎng)。已在DMEM/F-12之中成功培養(yǎng)的細胞包括MDCK、膠質細胞、成纖維細胞、人內皮細胞及小鼠成纖維細胞。
DMEM高糖與DMEM低糖的區(qū)別
低糖DMEM適合用于培養(yǎng)代謝作用較慢的細胞,高糖DMEM可以為細胞提供充足的碳源,適用于代謝快的細胞,如胚胎干細胞 (ES細胞) 等。同時,低糖的培養(yǎng)基有助于維持細胞的低分化狀態(tài),高糖培養(yǎng)基有助于細胞分化。此外,做單抗細胞融合時,一般也使用低糖培養(yǎng)基,因為高糖使細胞生長過快,不利于融合細胞的染色體穩(wěn)定。
知識延伸:培養(yǎng)基添加物的作用
L-谷氨酰胺:L-谷氨酰胺在細胞培養(yǎng)時是重要的。脫掉氨基后,L-谷氨酰胺可作為培養(yǎng)細胞的能量來源、參與蛋白質的合成和核酸代謝。L-谷氨酰胺在溶液中經(jīng)過一段時間后會降解,但是確切的降解率一直沒有最終確定。L-谷氨酰胺的降解導致氨的形成,而氨對于一些細胞具有毒性。
GlutaMAX-I:即L-丙氨酰-L-谷氨酰胺,是 L-谷氨酰胺的衍生物,可替代細胞培養(yǎng)基中等摩爾的L-谷氨酰胺。該物質在水溶液中十分穩(wěn)定,不會自發(fā)降解,而是通過細胞分泌的一種肽酶緩慢降解以釋放谷氨酰胺,再被細胞吸收利用。
HEPES:HEPES 是一種優(yōu)良的生物緩沖劑,對細胞無毒性作用,添加 HEPES 的培養(yǎng)基能夠較長時間保持恒定的 pH 范圍,可以有效地防止培養(yǎng)液 pH 波動較大對細胞生長產(chǎn)生不利的影響。一般進行克隆化培養(yǎng)時要添加HEPES。
酚紅:酚紅在培養(yǎng)基中被用來作為 pH 值的指示劑:中性時為紅色,酸性時為黃色,堿性時為紫色。研究表明,酚紅可以模擬固醇類激素的作用(特別是雌激素)。為避免固醇類反應,培養(yǎng)細胞,尤其是哺乳類細胞時,用不加酚紅的培養(yǎng)基。由于酚紅干擾檢測,一些研究人員在做流式細胞檢測時,不使用加有酚紅的培養(yǎng)基。
丙酮酸鈉:丙酮酸鈉可以作為細胞培養(yǎng)中的替代碳源。盡管細胞更傾向于以葡萄糖作為碳源,但是,如果沒有葡萄糖的話,細胞也可以代謝丙酮酸鈉。
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