硝酸鹽試驗的原理是什么?反應(yīng)可能出現(xiàn)哪幾種情況?
發(fā)布時間:2023-06-29 瀏覽次數(shù):2955
硝酸鹽(NO3)被還原為亞硝酸鹽(NO2),與醋酸鹽作用生成亞硝酸。亞硝酸與對氨基苯磺酸作用,生成偶氮苯磺酸,后者與α-萘胺結(jié)合為紅色的N-α-萘胺偶氮苯磺酸。一般有以下幾種情況:
① NO3-NO2:即還原硝酸鹽為亞硝酸鹽,如大腸埃希菌等。
② NO3-N2或其他產(chǎn)物(如N2O、NH2OH、NH3);不再存在亞硝酸鹽,又稱脫硝化作用。如沙雷菌屬和假單胞菌屬。這種結(jié)果,硝酸鹽還原結(jié)果可以陰性,須用2種方法才能表達(dá):一是鋅粉證實試驗,可于培養(yǎng)液中加入少許鋅粉,如出現(xiàn)紅色證明產(chǎn)生芳香肼,表示NO3仍存在證明NO3未被還原。另外一種方法是如NO3被還原成N2,可在硝酸鹽培養(yǎng)基中加一小導(dǎo)管(發(fā)酵管),如有氣體產(chǎn)生則說明NO3被還原成N2。
③ NO2-N2或其他產(chǎn)物:有些細(xì)菌不能還原硝酸鹽,但能還原亞硝酸鹽。須用亞硝酸鹽還原試驗才能測出。硝酸鹽還原試驗應(yīng)用十分廣泛,腸桿菌科細(xì)菌均能還原硝酸鹽為亞硝酸鹽,非發(fā)酵菌中有的能產(chǎn)生氮氣如銅綠假單胞菌、嗜麥芽窄食單胞菌、斯氏假單胞菌;有的則能將硝酸鹽還原成為亞硝酸鹽,如類鼻疽伯克菌等。硝酸鹽還原過程可因細(xì)菌不同而異,借此可予以鑒別。