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涂抹、落菌、水質(zhì)微生物取樣檢測(cè)檢驗(yàn)規(guī)范
發(fā)布時(shí)間：2023-07-07 瀏覽次數(shù)：688
| 檢測(cè)點(diǎn) | 檢驗(yàn)項(xiàng)目 | 技術(shù)要求 | 檢驗(yàn)方法 | 采樣方法 | 檢測(cè)頻率 | 判定方案 |
| 工器具、案板等接觸面（生產(chǎn)現(xiàn)場(chǎng)） | 菌落總數(shù) | ≤5000個(gè)/25cm2（生） | 梯度稀釋，傾注接種營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基，36±1℃，48h后計(jì)數(shù)，報(bào)告 | 用浸有滅菌生理鹽水的棉簽在被檢物體表面，取25cm2的面積，在其內(nèi)涂抹10次，然后剪去手接觸部分棉棒，將棉簽放入含10mL滅菌生理鹽水的采樣管內(nèi)送檢 | 1次/周/車(chē)間 | 一項(xiàng)不合格判為不合格品。不合格品按《不合格品控制程序》執(zhí)行 |
| ≤2500個(gè)/25cm2（熟） | ||||||
| 大腸菌群 | ≤30MPN/25cm2（生） | 試管法：梯度稀釋，三個(gè)稀釋度接種LST肉湯培養(yǎng)基各三管，36±1℃，48h后記錄產(chǎn)氣管數(shù)，然后復(fù)發(fā)酵，記錄產(chǎn)氣管數(shù)，查MPN表報(bào)告 | ||||
| 陰性（熟） | ||||||
| 員工手（生產(chǎn)現(xiàn)場(chǎng)） | 菌落總數(shù) | ≤5000個(gè)/手（生） | 梯度稀釋，傾注接種營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基，36±1℃，48h后計(jì)數(shù)，報(bào)告 | 被檢人五指并攏，用浸濕生理鹽水的棉簽在右手指曲面，從指尖到指端來(lái)回涂擦10次，然后剪去手接觸部分棉棒，將棉簽放入含10mL滅菌生理鹽水的采樣管內(nèi)送檢 | 1次/周/車(chē)間 | |
| ≤2500個(gè)/手（熟） | ||||||
| 大腸菌群 | ≤90MPN/手（生） | 試管法：梯度稀釋，三個(gè)稀釋度接種LST肉湯培養(yǎng)基各三管，36±1℃，48h后記錄產(chǎn)氣管數(shù)，然后復(fù)發(fā)酵，記錄產(chǎn)氣管數(shù)，查MPN表報(bào)告 | ||||
| 陰性（熟） | ||||||
| 空氣 | 車(chē)間（菌落總數(shù)） | ≤30個(gè)/皿 | 平板暴露法：車(chē)間在30m2以上者，于東、西、南、北（距墻1m處）、中五點(diǎn)；小于30m2者，于一條對(duì)角線里、中、外三點(diǎn)，高度均在1.5m處采樣，打開(kāi)平皿蓋，使平板在空氣中暴露30 min | 取樣后的瓊脂培養(yǎng)基于37℃溫箱培養(yǎng)48h后觀察結(jié)果，求出5個(gè)或3個(gè)采樣點(diǎn)的平均菌數(shù) | 2次/月/車(chē)間 | |
| 更衣室（菌落總數(shù)） | ≤40個(gè)/皿 | |||||
| 生產(chǎn)用水 | 菌落總數(shù) | ≤100CFU/mL | 梯度稀釋，傾注接種營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基，36±1℃，48h后計(jì)數(shù)，報(bào)告 | 對(duì)待取樣的水龍頭進(jìn)行消毒，并打開(kāi)水龍頭數(shù)分鐘，用經(jīng)過(guò)滅菌的玻璃采樣瓶去水樣0.5L后及時(shí)送檢，采樣后按照每125mL水樣加入0.1mg硫代硫酸鈉除去殘留余氯。 | 1次/月，全年檢測(cè)完所有水龍頭 | |
| 大腸菌群 | 不得檢出 | 多管發(fā)酵法： 1、乳糖發(fā)酵試驗(yàn)：接種5份10mL水樣雙料培養(yǎng)基，每份接種10mL水樣，將接種管置36℃±1℃培養(yǎng)箱內(nèi)，培養(yǎng)24h±2h，如所有乳糖蛋白膝培養(yǎng)管都不產(chǎn)氣產(chǎn)酸，則可報(bào)告為總大腸菌群陰性，如有產(chǎn)酸產(chǎn)氣者，則按下列步驟進(jìn)行。 2、分離培養(yǎng)：將產(chǎn)酸產(chǎn)氣的發(fā)酵管分別轉(zhuǎn)種在伊紅美藍(lán)瓊脂平板上，于36℃±1℃ 培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)18h—24h，觀察菌落形態(tài)，挑取符合下列特征的菌落作革蘭氏染色、鏡檢和證實(shí)試驗(yàn)。 3、證實(shí)試驗(yàn)：經(jīng)上述染色鏡檢為革蘭氏陰性無(wú)芽抱桿菌，同時(shí)接種乳糖蛋白胨培養(yǎng)液，置36℃±1℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h±2h，有產(chǎn)酸產(chǎn)氣者，即證實(shí)有總大腸菌群存在。 4、結(jié)果報(bào)告：查MPN ( most Probable number，最可能數(shù)）檢索表，報(bào)告每100mL水樣中的總大腸菌群最可能數(shù)（MPN）值。稀釋樣品查表后所得結(jié)果應(yīng)乘稀釋倍數(shù)。如所有乳糖發(fā)酵管均陰性時(shí)，可報(bào)告總大腸菌群未檢出。 | ||||
