血平板制作注意事項(xiàng)
發(fā)布時(shí)間：2023-09-21 瀏覽次數(shù)：2526
血瓊脂平板培養(yǎng)基，主要用于鏈球菌及其他苛養(yǎng)菌（對(duì)生長(zhǎng)環(huán)境、營(yíng)養(yǎng)要求較苛刻的細(xì)菌）的分離、培養(yǎng)或用于細(xì)菌溶血現(xiàn)象的觀察（如金黃色葡萄球菌、單核細(xì)胞增生李斯特氏菌等）。
1.成分：其中的蛋白胨和牛肉粉主要提供細(xì)菌生長(zhǎng)所需要的碳源、氮源、氨基酸及維生素。氯化鈉維持培養(yǎng)基中的滲透壓，瓊脂用做凝固劑。脫纖維羊血一方面提供一些特殊的生長(zhǎng)因子，另一方面用于觀察溶血反應(yīng)。
2.制法：根據(jù)要求選擇取不同的血瓊脂平板基礎(chǔ)，如營(yíng)養(yǎng)瓊脂、豆粉瓊脂或哥倫比亞瓊脂（用于營(yíng)養(yǎng)要求較高的細(xì)菌的培養(yǎng)及溶血試驗(yàn)）等，加蒸餾水溶解后，高壓滅菌。冷卻至50~55℃，加入一定量的羊血，緩慢混勻后傾注平板。注意一定要冷卻后再加入羊血，否則紅細(xì)胞有可能會(huì)破碎。
3.制備光潔平整不產(chǎn)氣泡的血平板技巧
自制的血平板有時(shí)會(huì)出現(xiàn)氣泡，坑洼凹凸不平的現(xiàn)象，如圖所示。
原因分析：很有可能是傾注培養(yǎng)基時(shí)培養(yǎng)基帶有氣泡，傾注平板，凝固后所致。
解決步驟：
（1）培養(yǎng)基滅菌后置水浴50-55℃保溫。
（2）血液一般冷藏。提前取出血液放置在室溫下，自然升溫至室溫。
（3）向培養(yǎng)基中添加血液。移液管吸取血液后加入培養(yǎng)基時(shí)，緩慢放液，同時(shí)緩慢搖動(dòng)三角瓶使相互混勻。
（4）傾注培養(yǎng)基后，找平穩(wěn)地方（越水平越好）冷卻。
（5）收皿疊放保存。
錯(cuò)誤操作：
（1）培養(yǎng)基滅菌后高溫直接加血傾注，皿蓋水汽很多，造成后續(xù)影響。
（2）血液如果直接從冰箱里拿出來就馬上加入培養(yǎng)基，由于溫差較大，加入后很容易形成片狀凝固。
（3） 放液太快容易形成片狀凝固。搖動(dòng)太劇烈會(huì)形成氣泡，培養(yǎng)基粘度大氣泡形成后很難消除。
（4）如果不是平面，液體保持水平，而皿是斜的，最后造成培養(yǎng)基在某一直徑上形成一邊高一邊低的現(xiàn)象。
（5）不可急著收皿或急脾氣急著查看皿凝固了沒有。有時(shí)候看似凝固了，只是表面，倒過來或移動(dòng)后以會(huì)造成培養(yǎng)基坍塌或坑洼不平。
來源：“食品微生物檢測(cè)”公眾號(hào),作者~菩提
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