速遞！2025版GB4789.3/GB4789.30/GB4789.38標(biāo)準(zhǔn)修訂亮點(diǎn)
發(fā)布時(shí)間：2025-03-28 瀏覽次數(shù)：101
好消息！好消息！大家期待已久的《GB?4789.3-2025 食品微生物學(xué)檢驗(yàn)?大腸菌群計(jì)數(shù)》《GB?4789.38-2025??食品微生物學(xué)檢驗(yàn)?大腸埃希氏菌計(jì)數(shù)》《GB?4789.30-2025??食品微生物學(xué)檢驗(yàn)?單核細(xì)胞增生李斯特氏菌檢驗(yàn)》終于在這春暖花開的季節(jié)發(fā)布了，新標(biāo)準(zhǔn)修訂內(nèi)容不僅體現(xiàn)了國(guó)內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)與國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)接軌的趨勢(shì)，而且使標(biāo)準(zhǔn)方法操作和結(jié)果報(bào)告處理更加靈活簡(jiǎn)單又快捷。為了方便大家快速清晰地了解這些新變化，小編梳理了一下這三個(gè)標(biāo)準(zhǔn)修訂內(nèi)容的亮點(diǎn)，具體見下表：
| 標(biāo)準(zhǔn) | 修訂內(nèi)容 |
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| GB 4789.3-2025 大腸菌群計(jì)數(shù) | 亮點(diǎn)一、創(chuàng)新：增加了大腸菌群測(cè)試片法，并明確測(cè)試片應(yīng)以發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣為陽性結(jié)果判斷依據(jù)，且性能符合 GB4789.28 中相關(guān)培養(yǎng)基的質(zhì)量要求。
亮點(diǎn)二、靈活：液體樣品稀釋明確了當(dāng)樣品不適宜進(jìn)行體積取樣時(shí)，按 6.1.1 固體和半固體樣品稱重操作。
亮點(diǎn)三、省時(shí)：MPN計(jì)數(shù)法 復(fù)發(fā)酵試驗(yàn)培養(yǎng)時(shí)間由“ 48h±2h ”修改為“ 24-48h ”，若最短培養(yǎng)時(shí)間內(nèi)得到陽性結(jié)果，則檢驗(yàn)周期可縮短 24h。
亮點(diǎn)四、全面：
1）在平板法 9.2 接種與培養(yǎng)中增加“對(duì)于乳及乳制品，應(yīng)置于 30℃±1℃ 培養(yǎng) 18h~ 24h ?！边@是基于國(guó)內(nèi)外文獻(xiàn)報(bào)道，培養(yǎng)溫度為 30 ℃ 時(shí)乳制品中大腸菌群平板計(jì)數(shù)的結(jié)果，顯著高于培養(yǎng)溫度為 36 ℃ 的計(jì)數(shù)結(jié)果，在國(guó)外相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)中已將乳制品中大腸菌群平板計(jì)數(shù)培養(yǎng)溫度規(guī)定為 30 ℃ 左右，以及修標(biāo)單位經(jīng)調(diào)查研究和實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證后，作出的修訂。
2）明確MPN 計(jì)數(shù)法初發(fā)酵試驗(yàn)，如接種體積超過 1mL ，則加到等體積的雙料LST肉湯中；
3）MPN 計(jì)數(shù)法初發(fā)酵試驗(yàn)陽性結(jié)果描述由“ 觀察倒管內(nèi)是否有氣泡產(chǎn)生 ”修改為“ 小倒管或產(chǎn)氣收集裝置內(nèi)有氣泡產(chǎn)生，或輕輕振搖 LST肉湯管 可見試管內(nèi)有細(xì)密氣泡不斷上升者，判斷為產(chǎn)氣”，更加詳細(xì)明了。
4）MPN計(jì)數(shù)法 的結(jié)果與報(bào)告增加“ 附錄C 確定最適的 3個(gè)連續(xù)稀釋度方法”，平板法的結(jié)果與報(bào)告增加“ 附錄D 規(guī)定了大腸菌群菌落數(shù)的計(jì)算、數(shù)值修約和結(jié)果報(bào)告的方式，并給出了相關(guān)示例。”，新增附錄讓實(shí)驗(yàn)結(jié)果處理變得簡(jiǎn)單。 |
| GB 4789.30-2025 單核細(xì)胞增生李斯特氏菌檢驗(yàn) | 亮點(diǎn)一、與國(guó)際接軌：
1）參照 ISO 方法和經(jīng)起草組驗(yàn)證，將 定性檢驗(yàn) 和 MPN法 中的選擇性增菌液體培養(yǎng)基由 LB1 和 LB2 修改為“ Fraser增菌肉湯(FB1、FB2)”；選擇分離顯色培養(yǎng)基“李斯特氏菌顯色平板“修改為“OA李斯特氏菌顯色平板”并在 附錄A 培養(yǎng)基和試劑中增加了 OA李斯特氏菌顯色培養(yǎng)基配方。
2）參照 ISO 等國(guó)際、國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)，將平板計(jì)數(shù)規(guī)則“ 所有平板菌落數(shù)合計(jì)在 15CFU ～ 150CFU 之間的平板，計(jì)數(shù)典型菌落數(shù)?！毙薷臑椤八衅桨宓湫秃涂梢删鋽?shù)合計(jì)在 15CFU ～ 150CFU 之間的平板，計(jì)數(shù)典型和可疑菌落數(shù)。”經(jīng)驗(yàn)證可提高結(jié)果的穩(wěn)定性。
亮點(diǎn)二、實(shí)惠省時(shí)：
1）結(jié)合我國(guó)現(xiàn)行有效的與單增李斯特菌限量指標(biāo)相關(guān)的標(biāo)準(zhǔn)將平板計(jì)數(shù)，“ 8.2 樣品的接種 ”將原來“ 每個(gè)稀釋度的樣品勻液分別吸取 1mL 以 0.3mL、0.3mL、0.4mL 的接種量分別接種 3塊李斯特氏菌顯色平板”修改為“ 每個(gè)稀釋度分別吸取 0.1mL 樣品勻液，接種1個(gè) OA李斯特氏菌顯色培養(yǎng)基（或其他等效的李斯 特氏菌顯色培養(yǎng)基）平板 ”，大大減少了顯色培養(yǎng)基的用量，又能滿足現(xiàn)行產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)需要。同時(shí)繼續(xù)保留“ 0.3mL、0.3mL、0.4mL 涂布法”，滿足檢出限更低的需求和方法的延續(xù)性。
2）在“ 5.5 鑒定 ”中增加“ 如選擇生化鑒定試劑盒或微生物生化鑒定系統(tǒng)，可不經(jīng) 5.4 初步鑒定，直接從 TSA-YE平板或羊血平板上挑取可疑菌落，用生理鹽水制備成濁度適當(dāng)?shù)木鷳乙?，使用微生物生化鑒定試劑盒或微生物生化 鑒定系統(tǒng)進(jìn)行鑒定。”結(jié)合使用生化鑒定試劑盒或微生物生化鑒定系統(tǒng)實(shí)際情況，優(yōu)化鑒定流程，縮短檢驗(yàn)時(shí)長(zhǎng)。
亮點(diǎn)三、嚴(yán)謹(jǐn)：
1）在 8.2 樣品的接種中增加“ 8.2.3 從樣品稀釋至樣品接種完畢不得超過 45min?！北苊獠僮鲿r(shí)間過長(zhǎng)影響計(jì)數(shù)結(jié)果。
2）在“ 5.2 分離 ”中增加顯色培養(yǎng)基菌落識(shí)別注意事項(xiàng)（避免假陰性和假陽性結(jié)果）： “注1：一些單核細(xì)胞增生李斯特氏菌在 OA李斯特氏菌顯色培養(yǎng)基上的菌落周圍的暈圈不明顯甚至沒有暈圈。還有一些單核細(xì)胞增生李斯特氏菌在 OA李斯特氏菌顯色培養(yǎng)基上的菌落周圍的暈圈出現(xiàn)得比較遲緩，有時(shí)需要 4d 以上才出現(xiàn)。
注2：伊氏李斯特氏菌在 OA李斯特氏菌顯色培養(yǎng)基上的菌落形態(tài)與單核細(xì)胞增生李斯特氏菌相似。” |
| GB 4789.38-2025 大腸埃希氏菌計(jì)數(shù) | 亮點(diǎn)一、與國(guó)際接軌：參考 ISO 方法和經(jīng)起草組驗(yàn)證，將大腸埃希氏菌MPN計(jì)數(shù)中復(fù)發(fā)酵陽性管劃線分離培養(yǎng)基 EMB 和平板計(jì)數(shù) VRBA-MUG 修改為“ 胰蛋白胨膽鹽 X-葡萄糖醛酸苷(TBX)瓊脂 ”，菌落觀察更加直觀清晰。并刪除了 MPN計(jì)數(shù)法“ 靛基質(zhì)試驗(yàn)、MR-VP試驗(yàn)和檸檬酸鹽利用試驗(yàn) ”對(duì)分離平板上可疑菌落進(jìn)行鑒定的內(nèi)容，檢驗(yàn)時(shí)長(zhǎng)縮短至少 24h。
亮點(diǎn)二、嚴(yán)謹(jǐn)：
1）刪除了術(shù)語和定義；增加了檢驗(yàn)原理，并注明“ 絕大多數(shù)大腸埃希氏菌具有β-葡萄糖醛酸苷酶活性，但大腸埃希氏菌O157 等菌株沒有β-葡萄糖醛酸苷酶活性。另外，腸桿菌科內(nèi)一些志賀氏菌、沙門氏菌等菌株也具有β-葡萄糖醛酸苷酶活性?！?/span>
2）本新標(biāo)準(zhǔn) MPN法中新增“ 對(duì)貝類及產(chǎn)品采用每個(gè)稀釋度接種 5管 LST肉湯的方法?！辈⑶倚略鱿鄳?yīng)“ 附錄C 貝類及產(chǎn)品中大腸埃希氏菌最可能數(shù)(MPN)檢索表”。
3）MPN計(jì)數(shù)法 初發(fā)酵試驗(yàn)陽性結(jié)果描述由“ 觀察倒管內(nèi)是否有氣泡產(chǎn)生 ”修改為“ 小倒管或產(chǎn)氣收集裝置內(nèi)有氣泡產(chǎn)生，或輕輕振搖 LST肉湯管可見試管內(nèi)有細(xì)密氣泡不斷上升者，判斷為產(chǎn)氣”，更加詳細(xì)明了。 |
最后，環(huán)凱微生物為助力各食品微生物檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室輕松應(yīng)對(duì)新標(biāo)準(zhǔn)更新帶來的工作量和挑戰(zhàn)，現(xiàn)已整理出相應(yīng)產(chǎn)品解決方案供選擇（見以下列表）！
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培養(yǎng)：36°℃，培養(yǎng)24h 判讀：含有四氮唑指示劑，菌落為紅色，發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸（黃色酸環(huán)）和產(chǎn)氣（伴有氣泡）。
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CRM019 OA李斯特氏菌顯色培養(yǎng)基（單增菌落：藍(lán)綠色光滑規(guī)則小菌落，周圍有乳白色脂肪沉淀環(huán)）
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CRM018A/CRM018 胰蛋白胨膽鹽X-葡萄糖醛酸苷(TBX)瓊脂培養(yǎng)基（大腸埃希氏菌菌落：藍(lán)綠色）
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GB4789.3-2025?大腸菌群計(jì)數(shù)產(chǎn)品解決方案
GB4789.30-2025 單核細(xì)胞增生李斯特氏菌檢驗(yàn)產(chǎn)品解決方案
GB4789.38-2025?大腸埃希氏菌計(jì)數(shù)產(chǎn)品解決方案
