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第一鏈cDNA合成試劑盒(規(guī)格:100次 | 貨號:HKE041-01B)

英文名稱:1st Strand cDNA Synthesis Kit

貨 號 :HKE041-01B

規(guī) 格 :100次

用途:第一鏈 cDNA 合成

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產(chǎn)品名稱:第一鏈cDNA合成試劑盒
英文名稱:1st Strand cDNA Synthesis Kit

產(chǎn)品編號與包裝規(guī)格:

編號產(chǎn)品名稱規(guī)格產(chǎn)品介紹產(chǎn)品價格
HKE041-01B第一鏈cDNA合成試劑盒100次1st Strand cDNA Synthesis Kit 1075

產(chǎn)品描述:第一鏈 cDNA 合成試劑盒(1st Strand cDNA Synthesis Kit)是以 mRNA 或者總 RNA 為模板, 效 合成第一鏈 cDNA。本試劑盒使用 Reverse Transcriptase 反轉(zhuǎn)錄酶(Cat.No: HKE123),它的 RNase H 的活性與 AMV 反轉(zhuǎn)錄酶相比較低。該反轉(zhuǎn)錄酶可耐受 42~50°C 溫度。試劑盒中含有重組RNA 酶抑制劑(Cat. No:HKE125),可耐受 55°C 高溫,有效防止RNA 降解;同時含有 Oligo(dT)18,用于以有 poly(A)尾 巴的mRNA 為模板合成 cDNA;本試劑盒也可采用基因特異性引物。合成的第一鏈 cDNA 能直接用作 PCR 或熒光定量 PCR 的模板,第 二鏈 cDNA 的合成或線 性 RNA 擴增,也可用于需要用帶有放射性或非放射性核苷酸標(biāo)記第一鏈 cDNA 的實驗。

產(chǎn)品特點:
      環(huán)凱生物反轉(zhuǎn)錄酶無 RNase H 活性,可避免第一鏈 cDNA 合成過程中,RNA/DNA 雜交模板鏈中 RNA     解,保證 cDNA合成的質(zhì)量。 
      反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)可使用 Random N6 或 Oligo(dT)18 為引物,也可同時使用 Random N6 和 Oligo(dT)18 做引物,或使用基因特異性引物進行反轉(zhuǎn)錄。

保存溫度:-20℃。

產(chǎn)品包裝:

50μL 擴增體系中,λDNA 為模板,擴增 1kb~20kb 片段。

注意事項:
      1)用 DEPC 處理實驗用到的所有實驗器材,或購買已經(jīng)證明無核酸酶的實驗用具,實驗過程戴手套并經(jīng)常更換手套,避免 RNA 酶的污染。
      2)確保所用試劑中無 RNA 酶污染。
      3)試劑盒要嚴(yán)格密封保存。在反轉(zhuǎn)錄過程中,所有管子確??蹏?yán)。
      4)純化過的 RNA 必須保證不含有鹽,金屬離子,乙醇和苯酚,以上成分會干擾第一鏈 cDNA 合成反應(yīng)。可采用乙醇沉淀 RNA 的方法去除掉痕量污染物。
      5)為保證反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)有效進行,需使用高質(zhì)量的 RNA 模板。
      6)有實驗結(jié)果提示,本反轉(zhuǎn)錄酶可在 15 分鐘內(nèi)完成 1kb 反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)。

操作方法:

常用PCR 循環(huán)

常用PCR 循環(huán):

常用PCR 循環(huán)

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