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細菌新型生化鑒定管使用說明
―― 071820 單核增生性李斯特氏菌生化鑒定盒（10種×10次）管
一）整套試劑及用品
鑒定生化反應(yīng)的 10 種試劑（表 1）、10 瓶 0.85%無菌生理鹽水、1 瓶 1 McFarland 的濁度管、10 支一次性吸管。
二）西林瓶的使用方法
開啟西林瓶前，用 75%酒精棉消毒西林瓶表面，在無菌條件下，按鋁蓋上的箭頭方向打開鋁蓋，撕開鋁蓋，打開西林瓶膠塞（如圖 1）。所有的西林瓶在使用后均高壓滅菌后方可棄去。
三）單核增生李斯特氏菌生化鑒定盒的詳細使用方法法
挑取選擇性培養(yǎng)基上的可疑菌落接種木糖、鼠李糖發(fā)酵管 36±1℃培養(yǎng) 24－48h，同時接種 TSA－YE 平板 30±1℃培養(yǎng) 24－48h，純培養(yǎng)物供染色鏡檢和生化試驗。
染色鏡檢：將上述純培養(yǎng)物做革蘭氏染色并做濕片檢查；李斯特氏菌為革蘭氏陽性小桿菌，大小為 0.4～0.5μm×0.5～2.0μm；用生理鹽水制成菌懸液，在油鏡或相差顯微鏡下觀察，該菌出現(xiàn)輕微旋轉(zhuǎn)或翻滾樣的運動。
過氧化氫酶試驗：挑取TSA-YE平板上的菌落于潔凈載玻片上，滴加 1 滴 3%的過氧化氫（H2O2）溶液，李斯特氏菌呈過氧化氫酶陽性反應(yīng)。
將上述可疑菌新鮮菌苔置于已配備的無菌生理鹽水中，與 1 McFarland的濁度管比濁，將菌懸液制備成 1McFarland (約 3.0×108cfu/mL )，用吸管吸取 2 滴（約 0.06mL）菌懸液加入每種微量生化管內(nèi)。將已接種的西林瓶再套上膠塞，一般采用全加塞（如圖 2 左兩瓶所示）， 特殊情況在下表注明采用半加塞（如圖 2 右兩瓶所示），直立于內(nèi)托的凹槽內(nèi)（如圖 2），或放置于合適的瓶架中，于 35－37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，結(jié)果觀察見表 1。
注意：如有特殊的接種方式、培養(yǎng)時間或培養(yǎng)方式，請詳見每種生化鑒定管附帶的使用說明。
四）單核細胞增生李斯特氏菌的主要生化特性及有關(guān)菌的區(qū)別見表 2。（只供參考）
