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產(chǎn)氣莢膜梭菌檢驗(yàn)注意事項(xiàng)

發(fā)布時(shí)間:2019-08-29    瀏覽次數(shù):4942

產(chǎn)氣莢膜梭菌為人類(lèi)氣性壞疽的主要病原菌。1892年,美國(guó)病理學(xué)家W.H.韋爾奇等自一尸體分出本菌,因而又稱(chēng)魏氏梭菌。菌體較大,大小為(0.9~1.3)×(3.0~9.0)微米,無(wú)鞭毛,有莢膜。芽孢橢圓形,位于次級(jí)端。厭氧不嚴(yán)格。菌落直徑2~5毫米,在血平板上會(huì)出現(xiàn)β溶血環(huán),并出現(xiàn)雙溶血帶。糖發(fā)酵能力強(qiáng),產(chǎn)酸產(chǎn)氣。本菌的特征之一是在牛乳培養(yǎng)基中呈暴烈發(fā)酵現(xiàn)象。本菌廣泛存在于土壤、 人和動(dòng)物的腸道以及動(dòng)物和人類(lèi)的糞便中,會(huì)散發(fā)臭味。

長(zhǎng)期以來(lái)產(chǎn)氣莢膜梭菌一直僅被認(rèn)為是一種創(chuàng)傷感染病原菌,直到1943年,才證實(shí)它可經(jīng)過(guò)消化道對(duì)人產(chǎn)生危害,為食物中毒病原菌。作為重要的病原菌,在食品及水的微生物檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)中均有涉及,如GB 4789.23-2012、GB 8538-2016 ,在微生物實(shí)驗(yàn)室產(chǎn)氣莢膜梭菌檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,應(yīng)注意以下四點(diǎn):

1、分離本菌采用TSC瓊脂(GB 4789.13-2012),添加樣品并傾注培養(yǎng)基后,需注意在培養(yǎng)基凝固后在表面再傾注一層培養(yǎng)基,使得樣品完全被培養(yǎng)基覆蓋。若產(chǎn)氣莢膜梭菌暴露在外界,則可能導(dǎo)致其菌落不顯黑色。

產(chǎn)氣莢膜梭菌ATCC13124

2、進(jìn)行暴烈牛乳發(fā)酵實(shí)驗(yàn)時(shí),含鐵牛乳培養(yǎng)基只煮沸溶解不滅菌的話(huà),能有效提前暴烈發(fā)酵的時(shí)間。此外,接種菌液時(shí),菌液濃度需較高,并且接種于培養(yǎng)基中下部,不能接種于培養(yǎng)基表面;因暴烈發(fā)酵時(shí)培養(yǎng)基會(huì)上升,因此培養(yǎng)及表面到試管口應(yīng)留一定空隙,防止實(shí)驗(yàn)過(guò)程中培養(yǎng)基溢出。

圖左為滅菌培養(yǎng)基,右圖為未滅菌培養(yǎng)基

3、乳糖明膠在溫度較高之時(shí)呈現(xiàn)液態(tài),此時(shí)接種接種FTG培養(yǎng)物至乳糖明膠生化管當(dāng)中即可。記得是在培養(yǎng)結(jié)束后將乳糖明膠放置4度1小時(shí),再觀察培養(yǎng)基的液化情況,而不是在培養(yǎng)基結(jié)束后立刻觀察。

陽(yáng)性                                               陰性

4、緩沖動(dòng)力硝酸鹽實(shí)驗(yàn),滴加硝酸鹽試劑甲、乙液以檢查亞硝酸鹽的存在。15 min 內(nèi)出現(xiàn)紅色者,表明硝酸鹽被還原為亞硝酸鹽;如果不出現(xiàn)顏色變化,則加少許鋅粉,放置10 min,出現(xiàn)紅色者,表明該菌株不能還原硝酸鹽。如果沒(méi)有出現(xiàn)顏色,說(shuō)明原菌已經(jīng)將硝酸鹽還原至氮?dú)馍踔龄@鹽。

產(chǎn)氣莢膜梭菌ATCC13124


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