宏基因組如何指導微生物分離培養(yǎng)
發(fā)布時間:2022-06-14 瀏覽次數(shù):1552
來源:中國科學報 作者:李晨 付松川
近日,中國農(nóng)業(yè)科學院北京畜牧獸醫(yī)研究所奶產(chǎn)品質量與風險評估科技創(chuàng)新團隊受邀撰寫綜述文章,闡述了宏基因組指導未培養(yǎng)微生物分離培養(yǎng)的機遇與挑戰(zhàn),系統(tǒng)總結了基于宏基因組分離培養(yǎng)未培養(yǎng)微生物的方法。相關綜述文章發(fā)表在《微生物》(Microbiome)。
隨著宏基因組測序技術快速發(fā)展,人們逐漸認識到環(huán)境、人體和動物等存在大量多樣的未培養(yǎng)微生物群落,并在地球生態(tài)系統(tǒng)中扮演著重要角色。盡管宏基因組數(shù)據(jù)加深了對未培養(yǎng)微生物群落結構和功能的認識,但由于缺乏未培養(yǎng)微生物菌株的分離,導致無法直接評估未培養(yǎng)微生物的代謝和生理功能,也不能驗證微生物物種間的相互作用等。
因此,分離培養(yǎng)未培養(yǎng)微生物,對帶動微生物組研究進入深水區(qū),推動生物及健康產(chǎn)業(yè)發(fā)展具有重要意義。當前,宏基因組數(shù)據(jù)井噴式爆發(fā),尤其是宏基因組組裝的基因組(MAG)提供了未培養(yǎng)微生物基因組信息,為指導靶標未培養(yǎng)微生物的分離和培養(yǎng)帶來了新的機遇。
該綜述歸納提出三種基于宏基因組數(shù)據(jù)分離和培養(yǎng)未培養(yǎng)微生物的方法。
一是特定培養(yǎng)條件的設計。根據(jù)宏基因組數(shù)據(jù)提供的微生物代謝、底物利用、氧需求、抗生素耐藥性等信息,結合平板稀釋培養(yǎng)、穩(wěn)定性同位素標記輔助拉曼活性微生物細胞分選等實現(xiàn)靶標微生物分離培養(yǎng)。
二是特異性抗體捕獲分離。預測靶標微生物基因編碼的膜蛋白或抗原表位,合成抗原蛋白后制備特異性抗體并進行熒光標記,被標記的抗體與靶標微生物結合,利用熒光細胞分選技術分離被標記的靶標微生物。
三是靶向功能基因篩選分離。基于靶標基因序列設計特定引物或探針,通過PCR或熒光原位雜交進行標記或篩選,利用細胞分選獲得靶標細胞,結合相應的抗生素或底物培養(yǎng)基,實現(xiàn)靶標微生物的分離。
該研究得到中國農(nóng)業(yè)科學院農(nóng)業(yè)科技創(chuàng)新工程和現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術研究體系等資助。
相關論文信息:https://doi.org/10.1186/s40168-022-01272-5