干粉培養(yǎng)基配置及使用時(shí)可能出現(xiàn)的問題與分析
發(fā)布時(shí)間：2022-06-22 瀏覽次數(shù)：2090
1，使用干粉培養(yǎng)基需要注意的問題
1) 干粉培養(yǎng)基及原材料
● 適宜保存在溫度為15 ~ 30°C的陰涼干燥的環(huán)境中
● 應(yīng)在產(chǎn)品外包裝上標(biāo)注開封使用的日期
● 使用前應(yīng)檢查干粉的理化屬性是否正常
2) 玻璃與塑料器皿
● 采用優(yōu)質(zhì)低堿性的硅酸鹽材料的玻璃器皿
● 避免洗滌劑殘留在器皿的表面
● 滴加酸堿指示劑檢驗(yàn)器皿上酸或堿的殘留，如滴加幾滴溴甲酚紫，酸性則指示劑呈黃色，堿性則指示劑呈藍(lán)色
● 棄去有蝕刻劃痕或破裂的器皿
3) 儀器設(shè)備
● 定期對(duì)實(shí)驗(yàn)室儀器設(shè)備進(jìn)行校準(zhǔn)，如天平、pH計(jì)、高壓滅菌鍋、水浴鍋等
4) 水
● 使用蒸餾水或去離子水
5) 溶解培養(yǎng)基
● 按照標(biāo)簽上的說明準(zhǔn)確稱量培養(yǎng)基
● 加入適量的蒸餾水或去離子水加熱至完全溶解，溶解過程中不斷攪動(dòng)培養(yǎng)基溶液，避免局部過熱
6) 高壓滅菌
● 按照標(biāo)簽上的說明設(shè)定一定的溫度和時(shí)間高壓滅菌
● 超過規(guī)定的滅菌時(shí)間或溫度，可能造成培養(yǎng)基中營養(yǎng)成分或某些抑制劑的破壞
7) 附加試劑
● 產(chǎn)品需要單獨(dú)添加的試劑(抑菌劑、血、血清等)必須是在培養(yǎng)基滅菌后冷卻至50C左右時(shí)加入
● 加入附加試劑后，需充分混勻
8) 培養(yǎng)基滅菌后分裝
● 分裝前使培養(yǎng)基冷卻至50C左右，并搖勻培養(yǎng)基
● 在超凈臺(tái)或超凈間迅速分裝。若鋪平板，分裝培養(yǎng)基后，掀蓋敞開- -小口，使培養(yǎng)基表面干燥
9) 保存
● 一般來說，對(duì)于配制好的培養(yǎng)基，密封包裝后放置2~ 8C冰箱中可保存1~2周
2、干粉培養(yǎng)基配制中的常見問題及原因
1) pH改變
● 配制培養(yǎng)基使用的水不符合要求
● 配置過程中培養(yǎng)基溫度過高，超過標(biāo)簽上規(guī)定的滅菌溫度或時(shí)間
● 沒有加熱充分溶解
● 反復(fù)復(fù)溶
● 保存條件不當(dāng)
● 器皿上有殘留的化學(xué)試劑
● 未在培養(yǎng)基冷卻時(shí)測定pH
2) 出現(xiàn)沉淀、渾濁
● 配制培養(yǎng)基使用的水不符合要求
● 沒有充分加熱溶解
3) 顏色變深
● 局部加熱過度出現(xiàn)焦化
● 反復(fù)復(fù)溶
4) 凝膠強(qiáng)度下降
● 加入水的量不準(zhǔn)確
● 培養(yǎng)基中的瓊脂沒有完全溶解
● 培養(yǎng)基的pH值不正常
● 反復(fù)復(fù)溶
5) 菌生長差或者菌落不典型
● 加熱滅菌時(shí)間過長
● 反復(fù)復(fù)溶
● 未充分混勻培養(yǎng)基
● 添加抗生素等試劑的量不準(zhǔn)確
● 染菌
