培養(yǎng)基抑菌劑有哪些?史上最全介紹!
發(fā)布時(shí)間:2022-08-29 瀏覽次數(shù):15433
在選擇性增菌、分離和計(jì)數(shù)培養(yǎng)基中常需要添加不同的抑菌劑,來抑制非目標(biāo)菌的生長(zhǎng),提高目標(biāo)菌檢出率。此類培養(yǎng)基質(zhì)量的優(yōu)劣,通常在于抑菌劑的選擇和質(zhì)量。抑菌劑原則上應(yīng)盡可能抑制非目標(biāo)菌生長(zhǎng),而不影響目標(biāo)菌生長(zhǎng)。新型抑菌劑的研發(fā)和生產(chǎn),將直接大幅度提高培養(yǎng)基質(zhì)量,能更加準(zhǔn)確和方便地檢測(cè)出致病微生物。
常用的抑菌劑可分為:膽汁提取物、化學(xué)抑菌劑、染料抑菌劑和抗生素等。
①膽汁提取物:膽鹽、膽酸、?;悄懰帷?br /> ②化學(xué)抑菌劑:亞硒酸鈉、亞碲酸鉀、十二烷基硫酸鈉、苯乙醇、溴化十六烷基三甲銨、四硫磺酸鈉、亞硒酸氫鈉、亞硫酸鉍、疊氮化鈉、亞硫酸鈉、丙酸鈉、醋酸鉈、碘液、玫瑰紅酸、高濃度氯化鈉等。
③染料抑菌劑:煌綠、孔雀石綠、結(jié)晶紫。
④抗生素類:青霉素G、硫酸慶大霉素、兩性霉菌B、多黏菌素B、多粘菌素E、鏈霉素、氯霉素、放線菌酮、頭孢霉菌、桿菌肽、萬古霉素、新生霉素、甲氧芐胺嘧啶(TMP)、磺胺吡啶、制霉菌素、土霉素等。
1. 膽鹽
常用膽鹽有牛膽鹽、豬膽鹽、三號(hào)膽鹽、去氧膽酸鈉。膽鹽是一種膽酸的鈉鹽,是微生物培養(yǎng)基中最常用的選擇性抑菌劑;從動(dòng)物膽汁中提取而來;是膽酸的羧基和甘氨酸或?;撬岬陌被ㄟ^酰胺鍵結(jié)合而成。脫氧膽酸鈉是在3號(hào)碳和12號(hào)碳上帶有羥基的二羥基化合物,缺少羥基的膽酸沒有活性。脫氧膽酸鈉在水溶液中呈弱堿性,為無色。膽鹽主要抑制革蘭氏陽性細(xì)菌生長(zhǎng)。其原理為降低培養(yǎng)基與菌膜界面上的表面張力,并使細(xì)胞膜紊亂,從而加速細(xì)胞自溶。膽鹽在pH值6.5以下會(huì)有膽酸析出物,在菌落周圍形成沉淀環(huán),使菌落色素不易向外擴(kuò)散,更有利于菌落的鑒別。
微生物培養(yǎng)基中應(yīng)用最多的為牛膽鹽,其質(zhì)量直接影響對(duì)革蘭氏陽性菌的抑制性。 由于生產(chǎn)工藝的不同,牛膽汁中有些油脂類物質(zhì)沒有除凈,配制培養(yǎng)基后會(huì)使液體培養(yǎng)基渾濁,而在含瓊脂培養(yǎng)基表面出現(xiàn)油狀物,影響培養(yǎng)基理化指標(biāo)。
膽鹽在1000mL培養(yǎng)基中用量:豬膽鹽5g?10g、牛膽鹽5g、去氧膽酸鈉1. 5g?2.5g、 三號(hào)膽鹽1g~l.5g。
2. 十二烷基硫酸鈉(SDS)
白色或淡黃色粉狀,易溶于熱水,溶于水,溶于熱乙醇,微溶于醇,不溶于三氯甲烷、 醚;對(duì)堿和硬水不敏感;分子式:C??H??SO?Na,相對(duì)分子質(zhì)量:288. 38,pH值:7.5?9.5; 是一種無毒的陰離子表面活性劑;其生物降解度>90%;主要是抑制革蘭氏陽性細(xì)菌生長(zhǎng)和發(fā)育。不同廠家和不同批號(hào)都存在差異,使用前應(yīng)進(jìn)行測(cè)試。在培養(yǎng)基中的用量為: 1000mL培養(yǎng)基中加入0. 1g?0. 2g。
3. 亞硒酸氫鈉
白色結(jié)晶,極易吸潮。易溶于水,不溶于醇。分子式:HNaO?Se,相對(duì)分子質(zhì)量 150.955。 屬劇毒品;對(duì)胎兒具有致畸性,使用時(shí)應(yīng)特別小心;主要用于沙門氏菌選擇性增菌培養(yǎng)基,例如,亞硒酸鹽胱氨酸增菌液(SC)等,對(duì)大腸埃希氏菌等大腸菌群和革蘭氏陽性菌具有強(qiáng)抑制性。對(duì)傷寒沙門氏菌和其他沙門氏菌僅輕微抑制。配制成培養(yǎng)基時(shí),不可加熱溫度過高,不應(yīng)超過50°C。否則,配制成的即用型培養(yǎng)基,極易析出紅色沉淀物,而使亞硒酸氫鈉失去或降低抑制性。
4. 亞啼酸鉀
白色易潮解的固體,易溶于水,加熱分解。有毒,使用時(shí)應(yīng)小心;可抑制絕大部分的革蘭氏陰性細(xì)菌,而大腸埃希氏菌O157菌、變形桿菌、霍亂弧菌對(duì)其耐受性強(qiáng)。在革蘭氏陽性細(xì)菌中,葡萄球菌和白喉?xiàng)U菌對(duì)其耐受性強(qiáng),其他革蘭氏陽性細(xì)菌受到不同程度的抑制。因此,亞啼酸鉀溶液常作為一種抑菌添加劑加入冷至50°C左右的培養(yǎng)基中。
5. 煌綠
本品為一種染料,又稱為翡翠綠、亮綠、孔雀綠G,金黃色閃光結(jié)晶,可溶于水和乙醇, 為三苯甲烷染料;能抑制革蘭氏陽性菌;高濃度時(shí),也可抑制大腸埃希氏菌等大腸菌群,而沙門氏菌對(duì)其耐受性強(qiáng)。在培養(yǎng)基中,常用于沙門氏菌選擇分離培養(yǎng)基。由于不同廠家 和不同批號(hào)的煌綠,其色素含量有差異,使用前需用標(biāo)準(zhǔn)菌株進(jìn)行測(cè)試實(shí)際使用量,以免抑制性過強(qiáng)或過弱。
6. 孔雀石綠
孔雀石綠是一種帶有金屬光澤的綠色結(jié)晶體,又名堿性綠、嚴(yán)基塊綠、孔雀綠,既是殺真菌劑,又是染料,易溶于水,溶液呈藍(lán)綠色;溶于甲醇、乙醇和戊醇;能抑制革蘭氏陽性菌;高濃度時(shí),也可抑制大腸埃希氏菌等大腸菌群,而沙門氏菌對(duì)其耐受性強(qiáng)。在培養(yǎng)基中,經(jīng)常用于沙門氏菌選擇增菌培養(yǎng)基。
7. 四硫磺酸鈉
由硫代硫酸鈉和碘經(jīng)氧化生成的四硫磺酸鈉,有抑制大腸埃希氏菌作用,而對(duì)沙門氏菌無抑制作用。因沙門氏菌有四硫磺酸酶,能分解四硫磺酸鈉,而大腸埃希氏菌沒有這種酶,所以生長(zhǎng)被抑制。四硫磺酸鈉對(duì)熱非常敏感,極易分解為硫酸、亞硫酸和硫。故培養(yǎng)基加碘液后不能再加熱。
8. 亞硫酸鉍
由檸檬酸鉍銨和亞硫酸鈉在水溶液中反應(yīng)生成亞硫酸鉍;可抑制革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌中的大腸菌群,而對(duì)沙門氏菌基本沒有抑制性。沙門氏菌還原鉍離子可使菌落著上金屬光澤。檸檬酸鉍銨的質(zhì)量好壞影響亞硫酸鉍的質(zhì)量,在使用前應(yīng)先檢測(cè)檸檬酸鉍銨和亞硫酸鈉的質(zhì)量。
9. 亞硫酸鈉
化學(xué)式Na?SO?,白色,單斜晶體或粉末;對(duì)眼睛、皮膚、黏膜有刺激作用,可污染水源;受高熱分解產(chǎn)生有毒的硫化物煙氣;具強(qiáng)還原性,可阻斷微生物的正常生理氧化過程,抑制微生物繁殖。添加于培養(yǎng)基中主要是抑制革蘭氏陽性菌生長(zhǎng)發(fā)育和繁殖。
10. 苯乙醇
β-苯乙醇,分子式為C?H??O,相對(duì)分子質(zhì)量為122. 17;無色黏稠液體,溶于水、甘油, 可混溶于醇、醚;主要抑制革蘭氏陰性菌。在微生物培養(yǎng)基中添加量約為0.25%。
11. 疊氮化鈉
化學(xué)式NaN?,相對(duì)分子質(zhì)量65.01,白色六方系晶體,無味,無臭,純品無吸濕性,劇毒;相對(duì)密度1.846;不溶于乙醚,微溶于乙醇(25°C時(shí) 0.3),溶于水;雖然無可燃性,但有爆炸性。主要抑制革蘭氏陰性細(xì)菌的生長(zhǎng)發(fā)育,對(duì)變形桿菌抑制效果非常顯著。在腸球菌選擇性分離培養(yǎng)基中的用量一般為0.05%左右;而金黃色葡萄球菌選擇性分離培養(yǎng)基中的用量一般約為0.02%。實(shí)際應(yīng)用和生產(chǎn)中應(yīng)進(jìn)行測(cè)試后,選定最佳的用量。
12. 結(jié)晶紫
別名龍膽紫,屬于三苯甲烷類染料消毒劑,和微生物酶系統(tǒng)發(fā)生氫離子的競(jìng)爭(zhēng)性對(duì)抗,使酶成為無活性的氧化狀態(tài),從而發(fā)揮殺菌作用。主要對(duì)革蘭氏陽性菌如葡萄球菌、 白喉?xiàng)U菌,以及綠膿桿菌、白念珠菌、表皮癬菌有殺滅作用,對(duì)其他革蘭氏陰性菌和抗酸菌幾乎無作用。培養(yǎng)基中的用量為0.0001%?0.0003%。
13. 玫瑰紅酸
別名薔薇酸,分子式C??H??O?,相對(duì)分子質(zhì)量290.32;深紅色結(jié)晶,有金屬光澤;也有帶深綠色金屬樣的黃棕色片;易溶于醇,呈金黃色溶液;溶于氫氧化鈉或氫氧化鉀溶液呈胭脂紅色;是一種酸堿指示劑,pH值6. 8(黃)?8.0(紅);同時(shí)也是一種抑菌劑,主要抑制革蘭氏陽性細(xì)菌生長(zhǎng)發(fā)育。每1000mL培養(yǎng)基中的用量一般為0.05g?0. 1g。
14. 溴化十六烷基三甲銨
白色微晶粉末,是一種季銨鹽,有吸濕性,在酸性溶液中穩(wěn)定,溶于水,易溶于乙醇,微溶于丙酮,幾乎不溶于乙醚和苯;能溶解細(xì)胞膜,是一種陽離子去污劑;能抑制革蘭氏陽性細(xì)菌和部分革蘭氏陰性細(xì)菌,銅綠假單胞菌等假單胞菌屬細(xì)菌對(duì)其耐受。每1000mL培養(yǎng)基的用量為0.2g?0.3g。
15. 高濃度氯化鈉
主要用于金黃色葡萄球菌培養(yǎng)基,因金黃色葡萄球菌能耐受7. 5%?10%氯化鈉濃度,而其他大部細(xì)菌生長(zhǎng)發(fā)育受抑制。1000mL培養(yǎng)基中的用量為75g?100g。
16. 醋酸鉈
分子式是T1(CH?COO)?,是一種劇毒物質(zhì);常用于培養(yǎng)支原體的培養(yǎng)基,可抑制絕大多數(shù)細(xì)菌和真菌的生長(zhǎng)發(fā)育。1000mL培養(yǎng)基的用量為0.1g?0.5g。由于其購買難度較大,通常在支原體培養(yǎng)基中都不加入,用抗生素代替使用。
17. 丙酸鈉
無色透明結(jié)晶或顆粒狀結(jié)晶粉末,略有特殊氣味。溶于水和乙醇,pH值為8. 5?10. 5??梢种泼咕?、酵母菌及細(xì)菌等,在酸性pH值中效果最佳,通常與其他抑菌劑協(xié)同使用。 1000mL培養(yǎng)基的用量為0. 1g?0. 5g。
18. 氯霉素
氯霉素是一種耐高溫高壓滅菌的抗生素,氯霉素對(duì)革蘭氏陽性、陰性細(xì)菌均有抑制作用,且對(duì)后者的作用較強(qiáng)。其中對(duì)傷寒桿菌、流感桿菌、副流感桿菌和百日咳桿菌的作用比其他抗生素強(qiáng),對(duì)立克次體感染如斑疹傷寒也有效,但對(duì)革蘭陽性球菌的作用不及青霉素和四環(huán)素。其抗菌作用機(jī)制是與核蛋白體 50S 亞基結(jié)合,抑制肽?;D(zhuǎn)移酶,從而抑制蛋白質(zhì)合成。本品常用于真菌選擇性分離或計(jì)數(shù)培養(yǎng)基,抑菌細(xì)菌的生長(zhǎng)發(fā)育。每1000mL培養(yǎng)基中用量為0. 05g?0. 1g。
19. 慶大霉素
慶大霉素是一種氨基糖苷類抗生素,主要用于抑制革蘭氏陰性菌。慶大霉素能與細(xì)菌核糖體 30S 亞基結(jié)合,阻斷細(xì)菌蛋白質(zhì)合成。慶大霉素是為數(shù)不多的具熱穩(wěn)定性的抗生素。
對(duì)大腸埃希氏菌、產(chǎn)氣桿菌、克雷伯氏桿菌、奇異變形桿菌、某些吲哚變形桿菌、綠膿桿菌、某些奈瑟菌、某些無色素沙雷桿菌和志賀氏菌等革蘭陰性菌有抗菌作用。革蘭陽性菌中,金黃色葡萄球菌對(duì)本品敏感,鏈球菌對(duì)本品耐藥。厭氧菌、結(jié)核桿菌、立克次體、病毒和真菌亦對(duì)本品耐藥。近年來,由于本品的廣泛應(yīng)用,耐藥菌株逐漸增多,綠膿桿菌、克雷伯氏桿菌和沙雷桿菌、吲哚陽性變形桿菌對(duì)本品的耐藥率甚高。對(duì)大腸埃希氏菌、產(chǎn)氣腸桿菌、奇異變形桿菌、綠膿桿菌等革蘭氏陰性細(xì)菌作用較強(qiáng)。每1000mL培養(yǎng)基中用量為 0. 005g?0. 02g。
20. 兩性霉素B
本品是一類多烯類抗真菌藥。黃色或橙黃色粉末;無臭或幾乎無臭,無味;有引濕性, 在日光下易被破壞失效。在二甲亞礬中溶解,在二甲基甲酰胺中微溶,在甲醇中極微溶解,在水、無水乙醇、三氯甲烷或乙醚中不溶。在中性或酸性介質(zhì)中可形成鹽,其水溶性增高但抗菌活性會(huì)下降。添加于培養(yǎng)基中,主要用于抑制霉菌和酵母菌等真菌生長(zhǎng)發(fā)育。 每1000mL培養(yǎng)基中用量為0.01g?0. 02g。
21. 多黏菌素 B 和 多黏菌素 E
為抗革蘭陰性桿菌抗生素,具殺菌作用,對(duì)大多數(shù)革蘭陰性桿菌有較強(qiáng)抗菌作用,對(duì)綠膿桿菌的作用更為顯著,對(duì)大腸埃希氏菌、沙門氏菌、痢疾桿菌、流感桿菌、百日咳桿菌、產(chǎn)氣腸桿菌及肺炎桿菌等也有良好的抑制作用。每1000mL培養(yǎng)基中用量為76700IU?100000IU。
22. 放線菌酮
從產(chǎn)生放線菌酮的放線菌發(fā)酵液中提得的一種抗生素。無色晶體。熔點(diǎn)119°C? 121°C。易溶于甲醇、乙醇和丙酮,微溶于水。耐酸、耐熱。在堿性情況下易分解。對(duì)酵母菌、霉菌、原蟲等病原菌等有抑制作用。對(duì)細(xì)菌無顯著抑制作用。每1000mL培養(yǎng)基中用量為 0. 05g?0. 1g。
23. 萘啶酮酸
主要對(duì)革蘭氏陰性菌有效,對(duì)大腸埃希氏菌、痢疾桿菌、傷寒桿菌及變形桿菌等,具抑菌和殺菌作用。其作用機(jī)制是抑制細(xì)菌脫氧核甘酸的合成。
24. 吖啶黃素
主要抑制革蘭氏陽性菌的生長(zhǎng)發(fā)育。常用于單核細(xì)胞增生增李斯特氏菌選擇性增菌培養(yǎng)基。
25. 萬古霉素
可抑制細(xì)菌細(xì)胞壁的合成,主要抑制革蘭氏陽性菌生長(zhǎng)發(fā)育,對(duì)金黃色葡萄球菌、化膿鏈球菌、肺炎鏈球菌等作用強(qiáng),對(duì)難辨梭狀芽孢桿菌、炭疽桿菌、白喉?xiàng)U菌等作用也良好。與其他抗生素?zé)o交叉耐藥性,極少有耐藥菌株。
26. 甲氧芐胺嘧啶(TMP)
抗菌增效藥,抗菌譜與磺胺藥物相似而效力較強(qiáng),對(duì)多種革蘭氏陽性和陰性細(xì)菌有效。甲氧芐啶與磺胺藥合用可使抗菌作用增強(qiáng)數(shù)倍至數(shù)十倍。該品主要用作磺胺類藥的增效藥。
27. 復(fù)達(dá)欣
其作用機(jī)制為影響細(xì)菌細(xì)胞壁的合成,本品對(duì)革蘭陽性菌的作用與第一代頭孢菌素近似或較弱;其中葡萄球菌、鏈球菌A 和 B群、肺炎鏈球菌對(duì)本品敏感。本品對(duì)革蘭陰性菌的作用較強(qiáng),對(duì)大腸埃希氏菌、腸桿菌屬、克雷伯氏桿菌、檸檬酸桿菌、奇異變形桿菌、普通變形桿菌、流感嗜血桿菌(包括耐氨芐青霉素菌株)、腦膜炎球菌等有良好的抗菌作用。
28. 拉氧頭孢
對(duì)多種革蘭陰性菌有良好的抗菌作用。大腸埃希氏菌、流感桿菌、克雷伯氏桿菌、各型變形桿菌、腸桿菌屬、枸櫞酸桿菌、沙雷氏桿菌等常對(duì)本品高度敏感。對(duì)厭氧菌有良好的抗菌作用。常用于各種革蘭氏陽性菌的分離培養(yǎng)基。每1000mL培養(yǎng)基用量為0.02g? 0. 05g。