微生物生長必備 — 培養(yǎng)基制備所需各類原材料介紹 ！
發(fā)布時間：2022-08-31 瀏覽次數(shù)：10174
微生物培養(yǎng)基是液體、半固體或固體形式的，含天然或合成成分，用于保證微生物繁殖(含或不含某類微生物的抑菌劑)、鑒定或保持其活力的物質(zhì)。主要是供給微生物生長所需要的碳源、氮源、維生素和生長促進(jìn)因子等，以合成原生質(zhì)和代謝產(chǎn)物并產(chǎn)生在各種生命活動中所需的能量。
1，水：制備培養(yǎng)基的水可以為蒸餾水、純化水或去離子水。電導(dǎo)率：在25°C時不應(yīng)超過2.5μS/cm。微生物污染：≤103CFU/mL，最好在102CFU/mL以下。不能含有殺菌劑或抑菌劑。不能使用礦泉水或自來水直接配制培養(yǎng)基。
2，蛋白胨：微生物培養(yǎng)基最常用的原材料之一。主要是供給微生物需要的氮源、氨基酸等。
蛋白胨主要特點(diǎn)為：
(1)易溶解于水；
(2)可被微生物直接利用于生長繁殖，不受高溫高熱而凝固；
(3)是一種兩性電解質(zhì)，具有緩沖作用。
3，心浸粉、肝浸粉、腦心浸粉：富含微生物生長促進(jìn)因子，特別適用于營養(yǎng)要求苛刻的微生物培養(yǎng)。
心浸粉：為新鮮牛心浸出物，富含微生物生長促進(jìn)因子,特別適用于營養(yǎng)要求苛刻的微生物培養(yǎng)。
肝浸粉：肝浸粉富含氨基酸、B族維生素和礦物質(zhì)(特別是鐵離子)可促進(jìn)營養(yǎng)要求苛刻的微生物生長和繁殖。
腦心浸粉：為牛心和牛腦混合浸出物,富含微生物生長促進(jìn)因子，特別適用于營養(yǎng)要求苛刻的微生物培養(yǎng)。常用于配制培養(yǎng)支原體等的培養(yǎng)基。
4，酵母浸粉：酵母浸粉是以高蛋白面包酵母或啤酒酵母為原料，經(jīng)自溶、酶解、濃縮、干燥等工藝制成的一種富含蛋白質(zhì)、氨基酸、肽、多肽、核酸、維生素及微量元素等營養(yǎng)成分。特別富含B族維生素，能夠促進(jìn)微生物快速生長和繁殖。為制備微生物培養(yǎng)基常用的原材料。其在培養(yǎng)基中用量為0. 3%~0.5%。
5，牛肉浸粉：采用新鮮牛肉經(jīng)過剔除脂肪、消化、過濾、濃縮、噴霧而得到的一種淡黃至米黃色粉末，不能使用來源于瘋牛病或動物疫病區(qū)域的牛肉。牛肉浸粉在培養(yǎng)基中為微生物生長和發(fā)育提供氮源和氨基酸，不含有可發(fā)酵糖，也是制備微生物培養(yǎng)基常用的原材料。不同廠家生產(chǎn)的牛肉浸粉質(zhì)量差別比較大。同一廠家不同批號的產(chǎn)品質(zhì)量也差別比較大。所以牛肉浸粉生產(chǎn)廠家應(yīng)控制和檢測牛肉的質(zhì)量，生產(chǎn)出質(zhì)量相對穩(wěn)定的產(chǎn)品。
6，無機(jī)成分：
主要指各種鹽類和離子。微生物生長需要的主要無機(jī)元素為鈉、鉀、鎂、鈣、鐵、錳、硫、磷、氯等。磷酸鹽同時具有緩沖作用。無機(jī)成分的生產(chǎn)工藝和質(zhì)量，也將嚴(yán)重影響培養(yǎng)基的質(zhì)量。
無機(jī)成分在微生物生長和發(fā)育過程中的主要功能為：
(1)構(gòu)成菌體的成分；
(2)作為酶的組成部分或促進(jìn)酶反應(yīng)；
(3)維持酸堿平衡或細(xì)胞內(nèi)的滲透壓；
(4)作為自養(yǎng)菌的能源。
不同的無機(jī)成分作用不同，其主要功能如下：
①磷：微生物細(xì)胞中磷的含量較多，磷在代謝活動中占有重要的地位，磷酸鹽是重要的緩沖劑，而且磷酸鹽可促進(jìn)芽孢的發(fā)育。
②硫：硫氫基(—SH)是許多酶類的必要基，也是某些自養(yǎng)菌的能源。
③鐵：是許多酶的組成部分。例如，過氧化氫酶、細(xì)胞色素氧化酶等，一定濃度的鐵離子，能促進(jìn)微生物毒素產(chǎn)生。
④鎂：鎂離子是許多酶的重要組成部分，能促進(jìn)微生物的細(xì)胞生長發(fā)育。
⑤錳：糖代謝中許多酶類的活性都需要錳，錳對于羧化作用是必需的元素。
⑥鈣：變形桿菌需要鈣以合成蛋白酶。
⑦鉀：鉀離子與磷的傳遞作用有關(guān)。
⑧氯化鈉：主要是維護(hù)微生物細(xì)胞的滲透壓。
7，可發(fā)酵性糖醇類化合物：
微生物可發(fā)酵性糖醇類化合物主要是糖類和醇類化合物。其在微生物生長發(fā)育過程中提供碳源和能源，促進(jìn)微生物個體分裂，增加微生物的數(shù)量。也可以用于微生物的生化鑒定，通過發(fā)酵糖醇產(chǎn)酸，有時會產(chǎn)生氣體或其他代謝產(chǎn)物，對不同微生物加以區(qū)別。
常用的各種糖類、醇類和糖苷類包括：
①單糖類：木糖、鼠李糖、葡萄糖、甘露糖、阿拉伯糖、半乳糖等。
②雙糖類：乳糖、蔗糖、麥芽糖、蕈糖等。
③三糖：棉子糖。
④多糖類：淀粉、糊精等。
⑤醇類有：甘露醇、衛(wèi)茅醇、肌醇、山梨醇、側(cè)盞金花醇(核糖醇)、丙三醇等。
⑥苷類：水楊苷(水楊素)、七葉苷(秦皮甲素)等。
培養(yǎng)基中各種糖醇的加入量為0.5%~ 1%。
不同糖醇類因高溫而呈不同程度的水解或焦化。若配制生化鑒定的培養(yǎng)基時，常把糖醇類單獨(dú)配制成一定濃度的溶液，經(jīng)0.22μm濾膜過濾除菌或115°C高壓滅菌20min后加入基礎(chǔ)培養(yǎng)基中。糖醇的質(zhì)量和純度是影響微生物生化鑒定的關(guān)鍵。國內(nèi)的糖醇生產(chǎn)廠家，應(yīng)改善糖醇的生產(chǎn)工藝，生產(chǎn)出高質(zhì)量的產(chǎn)品。目前，許多培養(yǎng)基廠家生產(chǎn)所需的糖醇都采用外國公司生產(chǎn)的產(chǎn)品。如七葉苷，國內(nèi)生產(chǎn)的主要是澄清度和純度不夠，此產(chǎn)品價格還非常昂貴。
8，生長促進(jìn)因子：
生長促進(jìn)因子是一類調(diào)節(jié)微生物正常生長代謝所必需，但不能用簡單的碳、氮源自行合成的有機(jī)物。廣義的生長因子除了維生素外，還包括堿基、嘌呤、嘧啶、生物素和煙酸等，有時還包括氨基酸營養(yǎng)缺陷突變株所需要的氨基酸；而狹義的生長因子一般僅指維生素。
常用微生物生長促進(jìn)因子有：鹽酸硫胺素(維生素B?)、核黃素(維生素B?)、泛酸(維生素B?)、煙酸(維生素B?)、 鹽酸吡哆醇(維生素B?)、葉酸(維生素B??)、對氨基苯甲酸(PABA)、生物素(維生素 H)、硫辛酸(維生素B??)、維生素 B??、維生素 K、腺嘌呤、鳥嘌呤、胸腺嘧啶、尿嘧啶等。在培養(yǎng)基中使用生長促進(jìn)因子時，應(yīng)控制用量，添加量過大時往往會抑制微生物的生長。添加適量時會促進(jìn)微生物生長發(fā)育良好，提高菌量。
