微生物限度培養(yǎng)基適用性常見問題解決
發(fā)布時(shí)間：2023-04-28 瀏覽次數(shù)：1202
1、在微生物實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行平板類培養(yǎng)基適用性的時(shí)候，可能會(huì)遇到以下常見的情況，造成試驗(yàn)失敗。
1）培養(yǎng)基平皿表面水珠凝聚，造成涂布培養(yǎng)后菌落蔓延無(wú)法計(jì)數(shù)。
2）培養(yǎng)后計(jì)數(shù)結(jié)果超標(biāo)。
3）培養(yǎng)后沒有逐日觀察，造成菌落生長(zhǎng)成團(tuán)，無(wú)法計(jì)數(shù)或計(jì)數(shù)結(jié)果統(tǒng)計(jì)錯(cuò)誤。
2、原因分析及解決措施
情況①：培養(yǎng)基平皿表面水珠凝聚的原因在于澆碟的時(shí)候，培養(yǎng)基溫度高，在平皿表面會(huì)形成水珠。
解決措施：培養(yǎng)基平皿表面水珠凝聚
◆ 培養(yǎng)基制備
培養(yǎng)基制備的一般流程：
① 上午10點(diǎn)開始用干粉培養(yǎng)基天平稱重，11點(diǎn)20開始滅菌，13:00開鍋，在滅菌鍋中冷卻至13:30。
② 將對(duì)照培養(yǎng)基置于50℃水浴鍋中待用。
知識(shí)點(diǎn)：滅菌鍋滅菌結(jié)束時(shí)，需要及時(shí)開鍋，避免培養(yǎng)基長(zhǎng)時(shí)間在滅菌鍋中缺氧，造成培養(yǎng)基品質(zhì)下降，培養(yǎng)基適用性失敗且影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
◆ 培養(yǎng)基澆碟
50℃水浴鍋取出后，一般5分鐘之內(nèi)將培養(yǎng)基澆置空平皿中。平皿冷卻后，觀察培養(yǎng)基表面有無(wú)水珠，若無(wú)水珠則可直接進(jìn)行涂布操作。多余的培養(yǎng)基可以放置在生物安全柜中或置密封袋（不是呼吸袋）里2-8℃保存。
若有水珠，若需要當(dāng)天使用則打開平皿蓋，輕輕甩掉表面的水珠，在運(yùn)行的生物安全柜中放置0.5-1h直到表面沒有水珠，然后進(jìn)行涂布計(jì)數(shù)。
若不需要當(dāng)天使用：
直接放置在生物安全柜中，蓋上平皿，生物安全柜關(guān)機(jī)，7天內(nèi)使用。
裝入自封袋中保存在2-8℃冰箱中，2周內(nèi)使用。使用前，提前一天取出，使平皿中水珠自動(dòng)蒸發(fā)消失。
情況②：培養(yǎng)后計(jì)數(shù)結(jié)果超標(biāo)的原因在于菌懸液制備不均勻。
每次制備的時(shí)候要渦旋3000轉(zhuǎn)30s，使用前再渦旋3000轉(zhuǎn)10s。特別是黑曲霉和白色念珠菌這種容易在底部沉底的菌，尤其需要注意。
情況③：培養(yǎng)后沒有逐日觀察，造成菌落生長(zhǎng)成團(tuán)。
無(wú)法計(jì)數(shù)或計(jì)數(shù)結(jié)果統(tǒng)計(jì)錯(cuò)誤，可以參考下圖解決這個(gè)問題。
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