幾種常見貼壁細(xì)胞培養(yǎng)技巧
發(fā)布時(shí)間：2023-06-06 瀏覽次數(shù)：1841
細(xì)胞生長(zhǎng)特性分為兩種，一種是貼壁一種是懸浮，不同的細(xì)胞形態(tài)對(duì)應(yīng)的操作方法也大有不同，今天我們主要講解一下貼壁細(xì)胞的相關(guān)培養(yǎng)技巧。
在操作貼壁細(xì)胞過程中，最重要的一個(gè)環(huán)節(jié)就是消化，消化時(shí)間需要根據(jù)每個(gè)細(xì)胞的狀態(tài)來調(diào)整，消化過度或者消化不充分都會(huì)對(duì)細(xì)胞造成影響。
貼壁細(xì)胞狀態(tài)，分為以下幾種：
1 疏松貼壁細(xì)胞
細(xì)胞傳代密度控制在80%左右最少不能低于60%，消化時(shí)間控制在1-2分鐘左右，傳代后48小時(shí)內(nèi)不要?jiǎng)釉摷?xì)胞，讓其慢慢貼壁，需要觀察時(shí)也要輕拿輕放。
如果液體中還有沒有貼壁的細(xì)胞，在下次換液時(shí)，可離心收集細(xì)胞。
2 容易分化的細(xì)胞
需使用較好的血清培養(yǎng)，盡量讓細(xì)胞生長(zhǎng)密度高一些，消化時(shí)觀察細(xì)胞的形態(tài)變化，變圓后及時(shí)終止消化處理。
減少吹打次數(shù)，避免不必要的機(jī)械損傷；輕柔吹打，避免氣泡產(chǎn)生，細(xì)胞呈單個(gè)狀態(tài)即可。
3 生長(zhǎng)緩慢的細(xì)胞
如果細(xì)胞突然生長(zhǎng)緩慢，需考慮是否是試劑的批次問題，細(xì)胞污染等可能性。如果本身細(xì)胞生長(zhǎng)較慢，需使用較好的血清培養(yǎng)，必要時(shí)可加大血清濃度（5%-10%左右），傳代時(shí)密度需在80%以上，密度太稀傳代會(huì)直接影響細(xì)胞的生長(zhǎng)周期及狀態(tài)，傳代比例控制在1:2或1:3。
4 聚團(tuán)成長(zhǎng)的細(xì)胞
聚團(tuán)成長(zhǎng)的細(xì)胞不容易生長(zhǎng)滿，在長(zhǎng)到70%-80%左右就可以傳代，消化時(shí)觀察細(xì)胞的形態(tài)變化，細(xì)胞變圓并有少量細(xì)胞脫落即可終止消化，較難消化的細(xì)胞，可以分次消化，相對(duì)增加消化時(shí)間。
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