介紹動物細(xì)胞的培養(yǎng)過程中所需要的培養(yǎng)器皿和操作器皿
發(fā)布時間:2023-11-08 瀏覽次數(shù):1139
要了解動物細(xì)胞培養(yǎng)的器皿,首先要了解動物細(xì)胞的培養(yǎng)過程。
1. 動物細(xì)胞培養(yǎng)的基本過程
取動物胚胎或幼齡動物器官、組織,將材料剪碎,并用胰蛋白酶(或用膠原蛋白酶)處理,形成分散的單個細(xì)胞,將處理后的細(xì)胞移入培養(yǎng)基中配成一定濃度的細(xì)胞懸浮液。
懸液中分散的細(xì)胞很快就貼附在瓶壁上,成為細(xì)胞貼壁,當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長到互相接觸時,細(xì)胞就會停止分裂增殖,出現(xiàn)接觸抑制。
此時需要將出現(xiàn)接觸抑制的細(xì)胞重新使用胰蛋白酶處理,再配成一定濃度的細(xì)胞懸浮液。另外,原代培養(yǎng)就是從機(jī)體取出后立即進(jìn)行的細(xì)胞、組織培養(yǎng)。
當(dāng)細(xì)胞從動植物中生長遷移出來,形成生長暈并增大以后,科學(xué)家接著進(jìn)行傳代培養(yǎng),即將原代培養(yǎng)細(xì)胞分成若干份,接種到若干份培養(yǎng)基中,使其繼續(xù)生長、增殖。
2. 動物細(xì)胞培養(yǎng)需要的器皿
細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室中主要有3類常見的培養(yǎng)用器皿,即:培養(yǎng)器皿、培養(yǎng)操作有關(guān)的器皿、其他用品。
(1)培養(yǎng)器皿:根據(jù)材質(zhì),分為玻璃培養(yǎng)器皿、塑料培養(yǎng)器皿。其中,前者優(yōu)點(diǎn)是易于細(xì)胞生長,易于清洗,可反復(fù)使用。后者優(yōu)點(diǎn)是價格便宜,為一次性使用。目前,常見的培養(yǎng)器皿有3種,即:培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)皿、多孔培養(yǎng)板。
培養(yǎng)瓶:為玻璃或塑料材質(zhì),用于培養(yǎng)及繁殖細(xì)胞。
將培養(yǎng)瓶置于95%空氣與5%CO2混合氣體的培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng),必要時可旋轉(zhuǎn)攪拌培養(yǎng)。旋轉(zhuǎn)攪拌培養(yǎng)可以使?fàn)I養(yǎng)物質(zhì)得到充分利用且可以使培養(yǎng)液獲得充足的氧氣以滿足細(xì)胞代謝的需要。
培養(yǎng)皿:為玻璃或塑料材質(zhì),有兩大用處,一是用于裝取、分離、處理組織,二是用于細(xì)胞毒性、單細(xì)胞分離、同位素?fù)饺雽?shí)驗(yàn)。
多孔培養(yǎng)板:為塑料材質(zhì),用于各種檢測實(shí)驗(yàn),如細(xì)胞克隆及細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)。
不同顏色的多孔培養(yǎng)板的用途不同,如透明的培養(yǎng)板適用于細(xì)胞培養(yǎng)與比色檢測、普通光學(xué)檢測;白色的培養(yǎng)板適用于化學(xué)發(fā)光法檢測,底物顯色;黑色的培養(yǎng)板適用于熒光法檢測,觀察帶熒光蛋白標(biāo)簽細(xì)胞。所有產(chǎn)品均以伽瑪射線滅菌處理。
(2)培養(yǎng)操作有關(guān)的器皿
細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室中培養(yǎng)操作有關(guān)的器皿主要有3種,即:貯液瓶、吸管、加樣器。
貯液瓶:用于存放或配制培養(yǎng)用液體,如培養(yǎng)液、血清及試劑等。
吸管:分為刻度吸管、無刻度吸管。前者用于吸取、轉(zhuǎn)移液體,常用規(guī)格為10ml、5ml、2ml、1ml。后者用于吸取、轉(zhuǎn)移液體,吹打、混勻及傳代細(xì)胞。
移液器:又稱“加樣器”,用于吸取、移動液體或滴加樣本。最好的是微量加樣器,吸量準(zhǔn)確、方便,可保證實(shí)驗(yàn)樣品(或試劑)含量精確,重復(fù)性良好。
另外,其他用品包括:離心管(收集細(xì)胞)、試管(放置試劑)、玻璃容器(存放吸管)、貯槽(存放小件培養(yǎng)物品)、凍存管(凍存細(xì)胞),以及各種注射器、燒杯、量筒、漏斗、酒精燈。
文章來源:“學(xué)甫無境”公眾號,作者~王甫榮。
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