食品中金黃色葡萄球菌（定量）檢測的能力驗(yàn)證
發(fā)布時間：2023-03-17 瀏覽次數(shù)：830
一、能力驗(yàn)證的目的
開展能力驗(yàn)證試驗(yàn)是檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室檢測能力和提高檢測水平的重要手段。利用實(shí)驗(yàn)室間的比對，對實(shí)驗(yàn)室的校準(zhǔn)或檢驗(yàn)工作進(jìn)行判定。目的是為了實(shí)現(xiàn)確定某個實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行某些特定檢測或測量能力，以及監(jiān)控實(shí)驗(yàn)室的持續(xù)能力。
二、能力驗(yàn)證步驟
1、前期做好充足的準(zhǔn)備工作，根據(jù)國家標(biāo)準(zhǔn)，盡可能制定一個檢驗(yàn)檢測的方案，以便保證結(jié)果的準(zhǔn)確性。
2、樣品來源：2瓶不同的真空西林瓶裝白色凍干粉末樣品
3、樣品處理
樣品儲存：-15℃以下冷凍保存
樣品活化步驟（建議）：-20℃~ 4℃（30min），然后室溫（30min），接著樣品再水化（盡量減少大范圍溫度變化對待測樣品的影響）。
樣品再水化：一般能力驗(yàn)證樣品以國體粉末形式發(fā)放，以液體（CFU/mL）形式出報告。樣品再水化前一定要認(rèn)真、仔細(xì)閱讀作業(yè)指導(dǎo)書，無特殊規(guī)定，本次水化后的樣品40mL為待測原液。
4、方法選擇國標(biāo)第二法
5、B-P平板計(jì)數(shù)（20 CFU ~200 CFU）
（1）1號樣品：37℃，培養(yǎng)48h
100稀釋（接種量0.3mL,0.3mL,0.4mL）
1000倍稀釋（接種量0.3mL,0.3mL,0.4mL）
（2）2號樣品：37℃，培養(yǎng)48h
10稀釋（接種量0.3mL,0.3mL,0.4mL）
100稀釋（接種量0.3mL,0.3mL,0.4mL）
平板涂布不是很好，有少部分菌落跑到了平板邊緣處，對于計(jì)數(shù)會有些影響。大家在該操作過程中涂布棒盡量不要接觸平板邊緣。
注意事項(xiàng)：
a.B-P瓊脂平板制作：盡量在試驗(yàn)前一天制作好，當(dāng)天制作平板得出的結(jié)果與之相差較大，原因可能是平板涂布時沒有完全干燥導(dǎo)致的。
b.梯度稀釋（25mL+225mL）：是關(guān)鍵步驟，必須盡可能地減少誤差（新手建議渦旋混勻，渦旋時間不宜過長，長時間離心力等作用下，微生物細(xì)胞可能死亡）。
c.涂布：盡可能涂布均勻，不要接觸平板邊緣，避免菌落疊在一起，而導(dǎo)致無法計(jì)數(shù)。
6、血平板（溶血觀察）
（1）1號樣品溶血情況（正反面）挑取平板5個菌落進(jìn)行試驗(yàn)（只列出前三個菌落結(jié)果）
（2）2號樣品溶血情況（正反面，只列出前三個菌落結(jié)果）
7、血漿凝固酶試驗(yàn)
（2）血漿凝固酶試驗(yàn)（凍干兔血漿：廣東環(huán)凱）
1號樣品：
2號樣品：
8、鏡檢
（1）1號樣品
（2）2號樣品
9、 能力驗(yàn)證結(jié)果
來源：“食品微生物檢測”公眾號 StreamCHC
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