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培養(yǎng)基:RPMI-1640和DMEM

發(fā)布時間:2023-05-15    瀏覽次數(shù):810

基礎(chǔ)培養(yǎng)基分為天然培養(yǎng)基和合成培養(yǎng)基

合成培養(yǎng)基:根據(jù)細胞生存所需物質(zhì)的種類和數(shù)量,用人工方法模擬合成的,目前有許多種培養(yǎng)基,如RPMI-1640、DMEM;

細胞完全培養(yǎng)基:90%合成培養(yǎng)基+10%血清+1%的雙抗

RPMI-1640

RPMI是Roswell Park Memorial Institute的縮寫,代指洛斯維·帕克紀念研究所。RPMI是該研究所研發(fā)的一類細胞培養(yǎng)基,1640是培養(yǎng)基代號。

RPMI-1640 培養(yǎng)基最初開發(fā)用于人白血病細胞的懸浮或單層培養(yǎng),后來被發(fā)現(xiàn)也適用于多種哺乳動物細胞,包括 HeLa 、 Jurkat 、 MCF-7 、 PC-12 、 PBMC 、星形膠質(zhì)細胞和癌細胞,尤其適用于懸浮細胞的培養(yǎng),是使用最為廣泛的培養(yǎng)基之一。

RPMI-1640培養(yǎng)基含有還原劑谷胱甘肽和高濃度的維生素、生物素、維生素 B12 、PABA,高濃度的維生素肌醇和膽堿。RPMI-1640 培養(yǎng)基不含蛋白、脂質(zhì)或生長因子,因此,RPMI-1640 需要補充劑,通常添加 10% 胎牛血清 (FBS)。

DMEM

DMEM是在最低必需培養(yǎng)基(Eagle"s minimum essential medium MEM)的基礎(chǔ)上發(fā)展而來的,分高糖型(含葡萄糖4500mg/L)和低糖型(含葡萄糖1000mg/L)兩種.

低糖適于依賴性貼壁細胞培養(yǎng),特別適用于生長速度快、附著性較差的腫瘤細胞培養(yǎng)。

高糖更適合高密度懸浮細胞培養(yǎng),也適用于附著性較差,但又不希望它脫離原來生長點的克隆培養(yǎng),也可用于雜交瘤中骨髓瘤細胞和DNA轉(zhuǎn)染的轉(zhuǎn)化細胞的培養(yǎng)。例如CHO細胞表達生產(chǎn)乙肝疫苗、CHO細胞表達EPO。

注:
貼壁生長:必須貼附于支持物表面才能生長。包括大多數(shù)上皮細胞,纖維細胞等
懸浮生長:不需要貼附于支持物表面,懸浮狀態(tài)下即可生長。包括淋巴細胞,腫瘤干細胞等

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