帶你了解大腸菌群復(fù)發(fā)酵培養(yǎng)基BGLB的前世今生！
發(fā)布時(shí)間：2023-10-25 瀏覽次數(shù)：6156
列位看官，你可知曉，市售的大腸菌群復(fù)發(fā)酵培養(yǎng)基BGLB，是有兩種配方滴。其一名喚煌綠乳糖膽鹽肉湯，其二稱著亮綠乳糖膽鹽培養(yǎng)液。
細(xì)細(xì)比對兩個(gè)配方，煌綠和亮綠其實(shí)是同一味藥的不同名稱，英文都曰Brilliant Green。這味藥在兩種處方中的劑量也不同，“煌綠”是0.0133 g，”亮綠”為0.0113 g，屬于同質(zhì)不同量。另外，這倆處方還有個(gè)區(qū)別，一個(gè)添的是20 g牛膽粉，另一個(gè)加的是2 g牛膽鹽?？蛇@到底是咋滴回事么？
這個(gè)問題按下不表，咱們先來扒一扒BGLB的羅曼史。
BGLB，洋人通常喚作Brilliant Green Bile Broth 2%（BGB）。 1936年，美國公共衛(wèi)生協(xié)會(APHA)發(fā)布的《水和廢水檢驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn)方法》中，將它用作大腸菌群的確認(rèn)培養(yǎng)基。當(dāng)時(shí)發(fā)現(xiàn)，把一些增菌后大量產(chǎn)氣的麥康凱肉湯接種到麥康凱瓊脂，用以確認(rèn)大腸菌群時(shí)，卻木有菌落形成。原來在麥康凱肉湯中產(chǎn)氣的那廝，不是別人，正是產(chǎn)氣莢膜梭菌！需要在厭氧條件下才能生長。各位看官，您遇到這種情況嗎：把產(chǎn)氣的LST接種到VRBA上，卻沒有細(xì)菌生長？
為了省略實(shí)驗(yàn)中繁瑣的分離和鑒定操作，微生物學(xué)家開始使用BGLB，來確認(rèn)大腸菌群。后來發(fā)覺，這BGLB的選擇性和特異性甚好，初發(fā)酵產(chǎn)氣后無需進(jìn)行細(xì)菌分離和生化實(shí)驗(yàn)，直接將初發(fā)酵的培養(yǎng)基轉(zhuǎn)種到BGLB中，煌綠和大量膽酸抑制了產(chǎn)氣莢膜梭菌和芽孢桿菌，確認(rèn)大腸菌群起來既省時(shí)又省力。也是這偏方有著不錯(cuò)的療效，后來在乳品和食品的大腸菌群檢驗(yàn)中，也逐漸流傳開來。
80多年彈指一揮間，BGLB的配方一直未變。經(jīng)過比較發(fā)現(xiàn)，那煌綠乳糖膽鹽肉湯與BGLB的傳統(tǒng)配方相同，而亮綠乳糖膽鹽培養(yǎng)液與BGLB的傳統(tǒng)配方不一致。咋地會有這種情況出現(xiàn)呢？
據(jù)說這亮綠乳糖膽鹽培養(yǎng)液，是用于測定天然礦泉水中大腸菌群的。咱們就再來聊一聊檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)，GB8538 的前世今生吧。
GB 8538于1987年首次制定，1995年、2008年和2016年先后經(jīng)過了三次修訂?？紦?jù)GB 8538歷年的版次發(fā)覺，這亮綠乳糖膽鹽培養(yǎng)液的方子，大約遺傳自1988年實(shí)施的GB 8538.62-1987。
在原始的配方中，亮綠的劑量是0.0133 g?？蓢@的是，2009年實(shí)施GB 8538-2008，卻將亮綠的劑量抄成了0.0113 g。現(xiàn)行的標(biāo)準(zhǔn)GB 8538-2016，也是照抄照搬，亮綠劑量的錯(cuò)誤因此延續(xù)至今。
如此這般，亮綠乳糖膽鹽培養(yǎng)液配方中的那2 g牛膽鹽，與BGLB傳統(tǒng)配方中的20 g牛膽粉，又作何解？
咱們還是再溫習(xí)一下微生物基礎(chǔ)知識吧。所謂牛膽鹽，是把牛膽汁用水解、脫脂、酸化等工藝制成的粉粉；而牛膽粉，卻是將那新鮮牛膽汁直接脫水干燥而成。在牛膽鹽中有效抑菌成分膽酸的含量，一般是80%左右，而牛膽粉中膽酸的含量約為40%，僅是牛膽鹽的一半。
所以呢，要達(dá)到同樣藥效，牛膽鹽的劑量應(yīng)該是10 g，而不是2 g。因此，亮綠乳糖膽鹽培養(yǎng)液的方子從開始就錯(cuò)了，這一錯(cuò)就是三十年！自2009年開始，這方子更是錯(cuò)上加錯(cuò)！
這些錯(cuò)誤的方子，流傳甚廣，遺害尤深。不僅誤導(dǎo)了微生物檢驗(yàn)猿，更是消遣了培養(yǎng)基生產(chǎn)商。廠家明知錯(cuò)誤也不敢改正，怕的是配方不符合標(biāo)準(zhǔn)引發(fā)用戶退貨。
人生本來，苦惱已多，犯個(gè)小錯(cuò)又如何？可是我的天，長達(dá)三十年的錯(cuò)誤啊，這讓無辜的檢驗(yàn)猿情何以堪！
有道是：情中情因情感妹妹，錯(cuò)里錯(cuò)以錯(cuò)勸哥哥。此時(shí)此刻，微生物檢驗(yàn)猿的心情，正與那多愁善感的林妹妹一般，雖然有萬句言詞，只是不能說得，半日，方抽抽噎噎的說道：“你從此可都改了罷！”
主要參考文獻(xiàn)：
1.APHA (1936). Standard Methods for the Examination of Water and Sewage, 8th New York: American Public Health Association.
2. Mackenzie E. F. W., Windle Taylor E. and Gilbert W. E. (1948) . Recent Experiences in the Rapid Identification of Bacterium coli Type I ,J. Gen. Microbiol. 2. 197-204.
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